Perché l'ingrandimento di una lente oleosa è maggiore di quello di una normale lente obiettiva?
Motivi per cui i batteri devono essere fissati prima della colorazione negli esperimenti microbiologici:
1: Uccidi le cellule e rendi la tintura facile da colorare.
Due: fare in modo che i batteri aderiscano al vetrino e non siano facilmente lavabili via dall'acqua.
Durante il fissaggio, asciugare lentamente. Se volete davvero accelerare il processo, potete asciugarlo per alcune volte a distanza sopra la fiamma di una lampada ad alcool. Non asciugare il vetro in modo che si riscaldi, altrimenti potrebbe distruggere la forma di vita batterica.
Colorazione di Gram e osservazione microscopica dei batteri
Principio sperimentale
Principio della colorazione di Gram: Le diverse reazioni dei batteri alla colorazione di Gram sono dovute alla diversa composizione e struttura delle loro pareti cellulari. La parete cellulare dei batteri Gram-positivi è principalmente una rete di peptidoglicani. Quando trattato con etanolo, la dimensione dei pori della struttura della rete diventa più piccola a causa della disidratazione e la permeabilità diminuisce, provocando così la formazione del complesso di cristalvioletto-iodio. La sostanza non viene eluita facilmente e rimane nelle cellule. Dopo la decolorazione e la controcolorazione viene mantenuto il colore blu-viola del colorante primario. Lo strato di peptidoglicano della parete cellulare dei batteri Gram-negativi è sottile e ha un alto contenuto lipidico. Pertanto, durante la decolorazione, i lipidi vengono sciolti dall'etanolo (o acetone) e la permeabilità della parete cellulare aumenta, rendendo il complesso cristalvioletto-iodio relativamente facile da eluire. Dopo la colorazione di contrasto, le cellule vengono colorate con il colore rosso della colorazione di contrasto. Principio dell'imaging al microscopio: i moderni microscopi ottici ordinari utilizzano due sistemi di lenti, oculari e lenti obiettive, per ingrandire le immagini, quindi sono spesso chiamati microscopi composti. Nel sistema ottico di un microscopio, la prestazione della lente dell'obiettivo è la più critica. La lente ad olio ha l'ingrandimento maggiore ed è la più importante per la ricerca microbiologica. Lo scopo principale dell'aggiunta di gocce di olio per lenti tra il vetrino e la lente è quello di aumentare la luminosità dell'illuminazione e aumentare la risoluzione del microscopio. L'uso dell'olio al posto dell'aria come mezzo di propagazione della luce riduce la rifrazione o la riflessione totale della luce, rendendo l'immagine osservata più chiara.
Cercare le colonie batteriche da osservare al microscopio a basso ingrandimento (continua a muovere il vetrino, se senti un'ombra rossa fermati subito, regola l'ingrandimento, se non è una colonia continua a guardare), alza il barilotto della lente , quindi passare alla lente dell'olio. Aggiungere una goccia di olio di cedro all'area del campione e utilizzare il regolatore grossolano per abbassare con attenzione il barilotto della lente in modo che la lente dell'olio sia immersa nell'olio per lenti e quasi a contatto con il campione. Sollevare il condensatore nella posizione più alta e aprire l'apertura. Utilizzare la regolazione grossolana per sollevare lentamente il barilotto dell'obiettivo finché l'immagine dell'oggetto non appare nel campo visivo e utilizzare la regolazione fine per renderla chiara e a fuoco.
