Qual è la differenza tra un microscopio a fluorescenza e un microscopio invertito
Nella coltura cellulare e nei relativi esperimenti derivati, il microscopio è uno strumento molto importante. Attualmente esistono sul mercato vari tipi di microscopi. È una sfida scegliere un microscopio che soddisfi le esigenze e sia applicabile. Quella che segue è un'introduzione ai principi dei microscopi invertiti e dei microscopi a fluorescenza, in modo che tu possa scegliere facilmente.
La composizione del microscopio invertito è la stessa di quella del microscopio ordinario, comprendente principalmente tre parti: la parte meccanica, la parte illuminante e la parte ottica.
La composizione del microscopio invertito è la stessa di quella del normale microscopio verticale, tranne per il fatto che la lente dell'obiettivo e il sistema di illuminazione sono invertiti, il primo è sotto il tavolino e il secondo è sopra il tavolino.
Una tale struttura può espandere in modo significativo la distanza effettiva tra il sistema di concentrazione dell'illuminazione e il palco, che è conveniente per posizionare oggetti più spessi da osservare, come piatti di coltura e bottiglie di coltura cellulare (ovviamente sono disponibili anche vetrini, ecc.) , e allo stesso tempo, la distanza tra la lente dell'obiettivo e il materiale. La distanza di lavoro tra loro non deve essere molto grande.
I microscopi invertiti sono utilizzati per l'osservazione di microrganismi, cellule, batteri, colture di tessuti, sospensioni, sedimenti, ecc. in unità mediche e sanitarie, istituti di istruzione superiore e istituti di ricerca. Può osservare continuamente il processo di riproduzione e divisione di cellule, batteri, ecc. nel mezzo di coltura e può scattare foto di qualsiasi forma durante il processo.
È ampiamente utilizzato in citologia, parassitologia, oncologia, immunologia, ingegneria genetica, microbiologia industriale, botanica e altri campi.
La microscopia a fluorescenza viene utilizzata per studiare l'assorbimento e il trasporto di sostanze nelle cellule, la distribuzione e la localizzazione di sostanze chimiche, ecc.
Per l'oggetto sotto ispezione, ci sono due modi per generare fluorescenza: autofluorescenza, che emette fluorescenza direttamente dopo essere stata irradiata con luce ultravioletta;
Alcune sostanze nelle cellule, come la clorofilla, producono autofluorescenza dopo essere state irradiate dai raggi ultravioletti; sebbene alcune sostanze stesse non possano emettere fluorescenza, possono anche emettere fluorescenza secondaria dopo essere state colorate con coloranti fluorescenti o anticorpi fluorescenti dopo essere state irradiate dai raggi ultravioletti.
Il microscopio a fluorescenza utilizza una sorgente di luce puntiforme ad alta efficienza luminosa per emettere luce di una certa lunghezza d'onda (luce ultravioletta 365 nm o luce blu viola 420 nm) attraverso il sistema di filtri come luce di eccitazione, e dopo aver eccitato le sostanze fluorescenti nel campione per emettere fluorescenza di vari colori, quindi l'osservazione viene eseguita attraverso l'ingrandimento della lente dell'obiettivo e dell'oculare.
In questo modo, sotto uno sfondo a forte contrasto, anche se la fluorescenza è molto debole, è facile da identificare e ha un'elevata sensibilità. Viene utilizzato principalmente per la ricerca della struttura e della funzione delle cellule e della composizione chimica.
