Cos'è la microscopia in campo oscuro? Quanto piccola può essere vista una cellula?
Il microscopio a campo oscuro è un tipo di microscopio ottico, chiamato anche ultramicroscopio. Al centro del condensatore di un microscopio a campo oscuro si trova uno schermo antiluce in modo che la luce di illuminazione non entri direttamente nell'obiettivo umano. Solo la luce riflessa e diffratta dal campione può entrare nella lente dell'obiettivo. Pertanto, lo sfondo del campo visivo è nero e i bordi degli oggetti sono luminosi. Di. Questo tipo di microscopio può vedere particelle piccole fino a 4~200 nm e la risoluzione può essere 50 volte superiore a quella dei normali microscopi.
principio
Il microscopio a campo oscuro viene modificato in base alla struttura del normale microscopio ottico utilizzando il principio dell'effetto ottico Tyndall. I condensatori per campo scuro permettono di bloccare il fascio centrale della sorgente luminosa. Non è possibile entrare nella lente dell'obiettivo attraverso il campione dal basso verso l'alto. Di conseguenza, la luce cambia percorso e si irradia obliquamente sul campione osservato. Il campione viene riflesso o disperso quando incontra la luce. La luce diffusa viene proiettata nella lente dell'obiettivo, quindi l'intero campo visivo è scuro.
Il principio base della microscopia in campo oscuro è l’effetto Tyndall. Quando un raggio di luce attraversa una stanza buia, si può osservare nell'aria un "percorso" di polvere brillante dalla direzione perpendicolare alla luce incidente. Questo fenomeno è l'effetto Tyndall. Dopo la sostituzione del microscopio a campo scuro con un condensatore a campo scuro su un normale microscopio ottico, a causa dell'occlusione della struttura parabolica interna del condensatore, la luce che si irradia sulla superficie dell'oggetto da ispezionare non può entrare direttamente nell'obiettivo lente e oculare e può passare solo la luce diffusa, riducendo così il campo visivo. è scuro. Poiché il microscopio a campo oscuro non emette luce trasparente nel sistema di osservazione diretta, quando non c'è oggetto, il campo visivo è scuro ed è impossibile osservare qualsiasi oggetto; quando c'è un oggetto, la luce rifratta dall'oggetto e la luce diffusa sono chiaramente visibili sullo sfondo scuro. . Quando si osserva un oggetto in un campo buio, la maggior parte della luce di illuminazione viene rifratta. A causa della posizione, della struttura e dello spessore dell'oggetto (campione), la diffusione e la rifrazione della luce variano notevolmente.
Struttura e modificazione
La struttura di base di un microscopio a campo oscuro è un normale set ottico da microscopio più una barriera luminosa. Un normale microscopio può essere convertito in un microscopio per campo scuro purché il condensatore sia rimovibile e il diametro della staffa sia adatto per l'installazione di un condensatore per campo scuro. Quando non è presente il condensatore del campo scuro, è possibile utilizzare carta nera spessa per creare uno schermo centrale contro la luce e posizionarlo sul telaio del filtro sotto il condensatore di un normale microscopio per ottenere l'effetto del campo scuro. Lo schermo antiluce viene utilizzato per bloccare la luce al centro della sorgente luminosa in modo che la luce possa entrare nel campione solo dall'ambiente circostante. La dimensione è più o meno la stessa della dimensione dell'apertura. Ingrandimenti diversi utilizzano aperture diverse, quindi è necessario realizzare blocchi di luce diversi.
Applicazione pratica
La microscopia in campo oscuro viene spesso utilizzata per osservare campioni trasparenti non colorati. Poiché questi campioni hanno un indice di rifrazione simile a quello dell’ambiente circostante, sono difficili da vedere chiaramente in normali condizioni di campo chiaro. Pertanto, le condizioni di campo scuro vengono utilizzate per migliorare il contrasto tra il campione stesso e lo sfondo. Questo tipo di microscopio può vedere particelle piccole fino a 4~200 nm. Può solo vedere l'esistenza, il movimento e le caratteristiche superficiali dell'oggetto, ma non può distinguere la struttura fine dell'oggetto. Clinicamente, la microscopia in campo oscuro è comunemente utilizzata per esaminare le spirochete pallide. Questo è un test patogeno, che è di grande importanza per la diagnosi della sifilide precoce.
