Cos'è un microscopio a contrasto di fase
Un microscopio a contrasto di fase è un microscopio in grado di convertire la differenza di fase (o differenza del percorso ottico) generata quando la luce passa attraverso un oggetto in una variazione di ampiezza (intensità della luce). Utilizzato principalmente per l'osservazione di cellule vive, sezioni di tessuto non colorate o campioni colorati privi di contrasto.
L'occhio umano può distinguere solo i cambiamenti nella lunghezza d'onda (colore) e nell'ampiezza della luce visibile, ma non può distinguere i cambiamenti di fase. La maggior parte dei campioni biologici sono altamente trasparenti e l'ampiezza delle onde luminose rimane sostanzialmente invariata dopo il passaggio, con solo cambiamenti di fase.
Il microscopio a contrasto di fase converte sostanzialmente la differenza del percorso ottico della luce visibile che passa attraverso il campione in differenza di ampiezza, migliorando così il contrasto tra le varie strutture e rendendole chiare e visibili. La luce si rifrange attraverso il campione, deviando dal percorso ottico originale e ritardata di 1/4 λ (lunghezza d'onda), se ulteriormente aumentata o diminuita di 1/4 λ, quindi la differenza del percorso ottico diventa 1/2 λ, L'interferenza tra i due assi fotosintetici si rinforzano, e l'ampiezza aumenta o diminuisce, aumentando il contrasto.
Dal punto di vista strutturale, la differenza tra la microscopia a contrasto di fase e la microscopia ottica ordinaria risiede in:
1. Apertura anulare Un diaframma con un'apertura circolare, installato tra la sorgente luminosa e il condensatore, per formare un cono cavo di luce che passa attraverso il condensatore e lo focalizza sul campione.
2. Il microscopio a differenza di fase ha aggiunto una piastra di fase rivestita con fluoruro di magnesio all'interno della lente dell'obiettivo per ritardare la fase della luce diretta o diffratta di 1/4 λ. Ci sono due aree sulla piastra di fase, la parte dove passa la luce diretta è chiamata "superficie coniugata" e la parte dove passa la luce diffratta è chiamata "superficie di compensazione". La scheda di fase è divisa in due tipologie in base al suo effetto di lavoro:
(1) Una scheda fase più: ritarda la luce diretta di 1/4 λ. Dopo la combinazione di due serie di onde luminose, l'ampiezza delle onde luminose aumenta e la struttura del campione diventa più luminosa del mezzo circostante, formando un contrasto luminoso (noto anche come contrasto negativo).
(2) Piastra di fase B più: ritardare la luce di diffrazione di 1/4 λ, dopo che i due gruppi di raggi luminosi si uniscono, le onde luminose si sottraggono e l'ampiezza diminuisce, risultando in una struttura del campione più scura rispetto al mezzo circostante, formando un contrasto scuro (noto anche come contrasto positivo). Un obiettivo con una piastra di fase è chiamato obiettivo a contrasto di fase e la parola "Ph" viene spesso utilizzata sul guscio esterno dell'obiettivo.
