Utilizzo dell'obiettivo per immersione in olio del microscopio
(1) Innanzitutto, osservare il contorno generale del campione con una lente obiettiva asciutta.
(2) Passare a un obiettivo a secco ad alto ingrandimento e spostare la parte target del campione al centro del campo visivo.
(3) Sollevare il tubo ottico di circa 1,5 cm, quindi ruotare l'obiettivo di immersione in olio nella posizione di lavoro.
(4) Mettere una piccola goccia di olio di cedro (o olio di paraffina) sull'area del coprioggetto da osservare. Per obiettivi ad immersione con NA > 1,0 o con illuminazione in campo scuro, è necessario aggiungere olio anche sul condensatore (questo passaggio viene generalmente omesso).
(5) Girare con attenzione la vite di messa a fuoco grossolana per abbassare lentamente il tubo ottico. Osservare attentamente la distanza tra la punta anteriore dell'obiettivo e il campione. Lasciare che la punta anteriore dell'obiettivo entri in contatto per prima con la goccia d'olio, quindi continuare ad abbassare lentamente il tubo finché la punta dell'obiettivo non si avvicina al vetrino coprioggetto (non toccarlo). Prestare particolare attenzione in questa fase per evitare di schiacciare il campione o di danneggiare l'obiettivo di immersione in olio (la distanza di lavoro dell'obiettivo dell'olio è solo di circa 0,2 mm).
(6) Guardare attraverso l'oculare e ruotare la vite di messa a fuoco fine per sollevare lentamente il tubo ottico finché il campione non è chiaramente messo a fuoco. Fare attenzione a non ruotare la vite di messa a fuoco micrometrica nella direzione sbagliata e schiacciare il campione.
(7) Dopo aver ottenuto un'immagine nitida, rimuovere l'oculare e guardare direttamente nel tubo. Chiudere il diaframma a iride del condensatore e poi aprirlo lentamente finché la sua apertura non corrisponde alla dimensione del campo visivo, in modo che l'apertura del condensatore corrisponda a quella dell'obiettivo. Se l'apertura del condensatore è inferiore all'apertura dell'obiettivo, non è possibile sfruttare appieno le prestazioni dell'obiettivo.
(8) Dopo l'osservazione, sollevare il tubo ottico di 1 cm, allontanare l'obiettivo a immersione in olio dall'asse ottico e pulirlo immediatamente. Rimuovere prima la maggior parte dell'olio con carta per lenti una o due volte. Quindi pulire due volte con carta per lenti inumidita con xilene, seguita da un pezzo di carta per lenti asciutto. Pulisci dritto lungo il diametro; non pulire in modo circolare attorno all'obiettivo. Utilizzare movimenti delicati e leggeri e non premere con forza. Pulire il condensatore allo stesso modo se dovesse penetrarvi olio. Per l'olio sul coprioggetto, utilizzare il "metodo pull-off": posizionare un piccolo pezzo di carta per lenti sopra la goccia d'olio sul coprioggetto, aggiungere una goccia di xilene sulla carta e tirare la carta verso l'esterno. Ripeti 3-4 volte per pulirlo. (Se si utilizza olio di paraffina, pulire prima con carta per lenti asciutta senza xilene; utilizzare lo xilene solo dopo l'esperimento.)
(9) Abbassare il condensatore di circa 1 cm e spostare il vetrino del preparato sul tavolino in una posizione adatta.
