Esistono due tipi di microscopi a fluorescenza rispetto al loro percorso ottico:
1. Microscopio a fluorescenza a trasmissione: la sorgente luminosa di eccitazione avviene attraverso lo specchio del condensatore attraverso il materiale del campione per stimolare la fluorescenza. Il collettore a campo scuro comunemente usato, può essere utilizzato anche il collettore ordinario, regolare il riflettore in modo che la luce di eccitazione venga trasmessa e bypassata al campione. Questo è il vecchio tipo di microscopio a fluorescenza. Il vantaggio è che la fluorescenza è forte a basso ingrandimento, mentre lo svantaggio è che la fluorescenza si indebolisce con l'aumento dell'ingrandimento. Quindi è meglio osservare il materiale campione più grande.
2. Microscopio a fluorescenza di tipo cadente questo è un nuovo tipo di microscopio a fluorescenza sviluppato in tempi recenti, e la differenza è che l'eccitazione della luce dalla lente dell'obiettivo fino alla superficie del campione, cioè la stessa lente dell'obiettivo di l'illuminazione del concentratore e la raccolta della lente obiettiva a fluorescenza. Il percorso ottico deve essere aggiunto a un separatore di fascio bicolore, che è di 45. angolo con l'uranio leggero, la luce di eccitazione viene riflessa nella lente dell'obiettivo e raccolta nel campione, la fluorescenza prodotta dal campione e dall'obiettivo superficie della lente, riflessione della superficie del vetro di copertura della luce di eccitazione nella lente dell'obiettivo contemporaneamente e ritorno al separatore di fascio bicolore, in modo che la luce di eccitazione e la fluorescenza siano separate dalla luce di eccitazione residua e quindi assorbite da i filtri di blocco. Se si cambia il diverso filtro di eccitazione/separatore di fascio bicolore/blocco combinato filtro di blocco, è possibile soddisfare le esigenze di diversi prodotti di reazione di fluorescenza. I vantaggi di questo microscopio a fluorescenza sono il campo visivo di illuminazione uniforme, immagini chiare, maggiore è l'ingrandimento della fluorescenza, più forte.
(B) metodo del microscopio a fluorescenza.
1. Aprire la sorgente luminosa, la lampada al mercurio ad altissima pressione per preriscaldarla per alcuni minuti per raggiungere il punto più luminoso.
2. Il microscopio a fluorescenza a trasmissione deve essere installato tra la sorgente luminosa e il concentratore necessario per stimolare il filtro, nella parte posteriore della lente dell'obiettivo con il corrispondente filtro di blocco. Il microscopio a fluorescenza a caduta deve essere inserito nella fessura del percorso ottico del filtro di eccitazione / separatore di fascio bicolore / inserti del filtro di blocco richiesti.
3. Osservare con una lente a basso ingrandimento e regolare il centro della sorgente luminosa in modo che si trovi al centro dell'intero punto di illuminazione in base al dispositivo di regolazione dei diversi modelli di microscopi a fluorescenza.
4. Posizionare la fetta del campione, è possibile osservare la messa a fuoco. L'uso dovrebbe prestare attenzione a: alla fine dell'installazione dei filtri non usare l'occhio per osservare direttamente, in modo da non causare danni agli occhi; con uno specchio ad olio per osservare il campione è necessario utilizzare uno speciale specchio ad olio non fluorescente; La lampada al mercurio ad alta pressione non può essere riaperta immediatamente dopo la chiusura della lampada, sono necessari 5 minuti prima di poterla riavviare, altrimenti sarà instabile, compromettendo la durata della lampada al mercurio.
(C) osservazione Sotto il microscopio a fluorescenza sul palco di insegnamento con un filtro di luce blu-viola, si possono vedere cellule colorate con lo 0,01% di colorante fluorescente arancione amidina, e il nucleo e il citoplasma delle cellule vengono eccitati per produrre due diversi colori della fluorescenza (verde scuro e rosso-arancio).
