Diversi problemi nell’uso della microscopia a contrasto di fase:
(1) Inversione di fase quando n '
(2) L'alone e l'effetto di oscuramento graduale nel processo di imaging della microscopia a contrasto di fase, quando una struttura diventa più scura a causa del ritardo di fase, non è una perdita di luce, ma un risultato della ridistribuzione della luce sul piano dell'immagine. Pertanto, la luce che scompare chiaramente nelle aree scure apparirà come un alone luminoso attorno agli oggetti più scuri. Questo è uno svantaggio della microscopia a contrasto di fase che ostacola l'osservazione delle strutture fini. Quando l'apertura anulare è molto stretta il fenomeno dell'alone è più intenso. Un altro fenomeno della microscopia a contrasto di fase è l'effetto dimming, che si riferisce a una diminuzione del contrasto ai bordi di un'area più ampia con lo stesso ritardo di fase osservato durante l'osservazione a contrasto di fase.
(3) L'influenza dello spessore del campione Quando si osserva la differenza, lo spessore del campione dovrebbe essere 5 μm o più sottile. Quando si utilizzano campioni più spessi, lo strato superiore del campione è chiaro, mentre lo strato più profondo sarà sfocato e produrrà un'interferenza di sfasamento e un'interferenza di diffusione della luce.
(4) L'influenza del vetro di copertura e del vetrino sul campione deve essere coperta con un vetro di copertura, altrimenti è difficile che l'anello luminoso dell'apertura anulare e l'anello scuro della piastra di fase si sovrappongano. L'osservazione differenziale ha anche requisiti elevati per la qualità del vetro del vetrino e del vetro di copertura. La presenza di graffi, spessore irregolare o irregolarità irregolari può causare la distorsione dell'anello luminoso e l'interferenza di fase. Inoltre, se il vetrino è troppo spesso o troppo sottile, l'apertura anulare diventerà più grande o più piccola.
Attualmente, i microscopi ottici si sono evoluti dai tradizionali microscopi biologici a vari tipi di microscopi specializzati. Secondo i loro principi di imaging, possono essere suddivisi in:
① Microscopio ottico geometrico: incluso microscopio biologico, microscopio a luce cadente, microscopio invertito, microscopio metallografico, microscopio a campo oscuro, ecc.
② Microscopio ottico fisico: incluso microscopio a contrasto di fase, microscopio a polarizzazione, microscopio a interferenza, microscopio a polarizzazione a contrasto di fase, microscopio a interferenza a contrasto di fase, microscopio a fluorescenza a contrasto di fase, ecc.
③ Microscopi per la conversione delle informazioni: compresi microscopi a fluorescenza, microspettrometri, microscopi per l'analisi delle immagini, microscopi acustici, microscopi fotografici, microscopi televisivi, ecc.
Elencare diversi usi dei microscopi: a Microscopio biologico: in generale, i microscopi possono essere suddivisi in stereomicroscopi e microscopi biologici. A causa dei diversi scopi ed esigenze, sono emersi molti rami, ma i principi di base rimangono gli stessi. La polarizzazione, il contrasto di fase, la trasmissione e la luce cadente sono ancora classificati come microscopi biologici. Il microscopio stereoscopico, noto anche come microscopio anatomico, microscopio solido e stereomicroscopio, è un microscopio versatile. È facile da usare, ha requisiti minimi per i campioni, ha una lunga distanza di lavoro e ha un forte senso di tridimensionalità durante l'osservazione. Può essere utilizzato per osservare oggetti fisici o eseguire alcune operazioni sui campioni durante l'osservazione. Invece di affettare il campione come un microscopio biologico, l'affettamento richiede tecnologia e attrezzature adeguate. Pertanto, gli stereomicroscopi hanno una vasta gamma di applicazioni in campi quali la microelettronica, l'assemblaggio e la manutenzione di strumenti di precisione e la microincisione. Ampiamente utilizzata in anatomia e microchirurgia nei campi della biologia e della medicina (attualmente classificati come microscopi chirurgici), la sorgente luminosa utilizzata in biologia e medicina non può che essere una sorgente di luce fredda (fibra ottica); Utilizzato nell'industria per l'osservazione, l'assemblaggio, l'ispezione e altri lavori su piccole parti e circuiti integrati. Microscopio metallografico: a molti piace scriverlo come "microscopio metallografico". Il microscopio metallografico è un microscopio utilizzato specificatamente per osservare la struttura metallografica di oggetti opachi come metalli e minerali. Questi oggetti opachi non possono essere osservati in un normale microscopio a trasmissione, quindi la differenza principale tra loro e un normale microscopio è che il primo utilizza la luce riflessa, mentre il secondo utilizza la luce trasmessa per l'illuminazione. In un microscopio metallografico, il raggio di illuminazione viene diretto dalla lente dell'obiettivo alla superficie dell'oggetto osservato, riflesso dalla superficie, e quindi restituito alla lente dell'obiettivo per l'imaging. Questo metodo di illuminazione riflettente è ampiamente utilizzato anche nel rilevamento di wafer di silicio di circuiti integrati.
