Componenti chiave e loro funzioni: microscopi confocali a scansione laser
1. Foro stenopeico di illuminazione
Funzione: far passare il laser attraverso il foro stenopeico di illuminazione per formare una sorgente luminosa puntiforme, che presenta vantaggi unici come forte direzionalità, piccola divergenza, elevata luminosità, elevata coerenza spaziale e temporale ed eccitazione di polarizzazione planare. E forma un dispositivo confocale con il foro stenopeico del rilevatore e il piano focale.
2. Divisore del raggio
Funzione: separare la fluorescenza di eccitazione del campione da altre luci non segnaletiche.
3. Lente dell'obiettivo
4. Piano focale
Funzione: la sorgente luminosa puntiforme del laser si concentra sull'oggetto sul piano focale, eccitando il campione etichettato in modo fluorescente affinché emetta fluorescenza e formi una macchia focale. Il punto luminoso viene elaborato da una serie di dispositivi come una lente obiettiva e un divisore di raggio e focalizzato in due posizioni: il foro stenopeico dell'illuminazione e il foro stenopeico del rilevatore. Da qui il significato di confocale.
5. Foro stenopeico del rilevatore
Funzione: funziona come filtro spaziale. *Per massimizzare l'ostruzione della luce diffusa sul piano non focalizzato e della luce diffusa all'esterno del punto non focale sul piano focalizzato, al fine di garantire che tutti i segnali di fluorescenza ricevuti dal foro stenopeico del rilevatore provengano dalla posizione focale del punto campione. Pertanto, il punto focalizzato sulla diffrazione sul campione e il punto di imaging del foro stenopeico del rivelatore contengono le stesse informazioni (due punti coniugati).
6. Tubo fotomoltiplicatore (rivelatore)
Funzione: riceve segnali luminosi attraverso fori stenopeici, li converte in segnali elettrici e li trasmette al computer, ottenendo un'immagine chiara dell'intero piano focale sullo schermo.
7. Laser: lo sviluppo della tecnologia della microscopia confocale non può essere separato dal rapido sviluppo dei laser. Possiamo scegliere diversi laser in base alle nostre esigenze di ricerca. come ArUV(351.364nm),HeCd(442nm),AR(457.488.514nm),ArKr(488.568.647nm)Kr(568nm),HeNe(543nm),HeNe(633nm) Attendere.
8. Canali di fluorescenza multipli: avere più canali di fluorescenza per ottenere più etichettature di campioni contemporaneamente.
