Introduzione ai microscopi ottici generali
Il microscopio è lo strumento principale per osservare le cellule. In base alle diverse sorgenti luminose, possono essere suddivisi in due categorie: microscopi ottici e microscopi elettronici. Il primo utilizza la luce visibile (il microscopio UV utilizza la luce ultravioletta) come sorgente luminosa, mentre il secondo utilizza il fascio di elettroni come sorgente luminosa. I microscopi ottici ordinari e i microscopi confocali laser sono entrambi microscopi ottici.
I microscopi biologici ordinari sono composti da tre parti, vale a dire: ① sistema di illuminazione, comprendente sorgente luminosa e condensatore; ② sistema di ingrandimento ottico, costituito da obiettivo e oculare, che è il corpo principale del microscopio. Per eliminare l'aberrazione sferica e l'aberrazione cromatica, sia l'oculare che l'obiettivo sono composti da un complesso composto da un gruppo di lenti; ③ dispositivo meccanico, utilizzato per fissare i materiali e facilitare l'osservazione.
La nitidezza dell'immagine al microscopio dipende non solo dall'ingrandimento, ma anche dalla risoluzione del microscopio. La risoluzione si riferisce alla capacità del microscopio (o dell'occhio umano a 25 cm di distanza dal bersaglio) di distinguere la distanza più piccola tra gli oggetti. La dimensione della risoluzione determina In base alla lunghezza d'onda della luce, al rapporto di apertura della lente e all'indice di rifrazione del mezzo, la formula è espressa come:
R=0.61λ/NANA =ｎsin /2
Nella formula: n=indice di rifrazione del mezzo; =angolo di apertura dello specchio (l'angolo di apertura del campione rispetto all'apertura della lente dell'obiettivo), NA=apertura numerica. L'angolo dello specchio è sempre inferiore a 180 gradi, quindi il valore massimo di sina/2 deve essere inferiore a 1.
L'indice di rifrazione del vetro utilizzato per realizzare le lenti ottiche è 1,65~1,78. Più l'indice di rifrazione del mezzo utilizzato è vicino a quello del vetro, meglio è. Per gli obiettivi asciutti, il mezzo è l'aria e il rapporto di apertura della lente è generalmente 0.05~0,95; per le lenti oleose, come mezzo viene utilizzato l'olio di cedro e il rapporto di apertura della lente può essere vicino a 1,5.
La lunghezza d'onda della luce ordinaria è 400~700 nm, quindi il valore di risoluzione del microscopio non sarà inferiore a 0,2 μm. La risoluzione dell'occhio umano è 0,2 mm, quindi l'ingrandimento massimo del design generale del microscopio è solitamente 1000X.
