Requisiti per la preparazione dei campioni al microscopio a fluorescenza
(i) Diapositive
Lo spessore del vetrino dovrebbe essere compreso tra 0,8 e 1,2 mm, pendii troppo spessi da un lato, un maggiore assorbimento della luce, dall'altro, non possono far sì che l'eccitazione della luce nel campione raccolto. Il vetrino deve essere liscio, di spessore uniforme, senza autofluorescenza evidente. A volte è necessario utilizzare vetrini di vetro al quarzo.
(ii) coprioggetto
I vetrini coprioggetto sono spessi circa 0,17 mm e lisci. Per migliorare l'eccitazione della luce, può essere utilizzato anche per interferire con il coprioggetto, si tratta di una superficie speciale placcata con una serie di strati di diverse lunghezze d'onda della luce che svolgono un ruolo diverso nell'interferenza di sostanze (come il fluoruro di magnesio) di il coprioggetto, che può rendere la fluorescenza attraverso la superficie liscia e riflettere l'eccitazione della luce, il riflesso dell'eccitazione della luce femminile può essere l'eccitazione del campione.
(C) campioni
Le sezioni di tessuto o altri campioni non possono essere troppo spessi, ad esempio la luce di eccitazione troppo spessa viene consumata principalmente nella parte inferiore del campione e la lente dell'obiettivo osservata direttamente nella parte superiore dell'eccitazione insufficiente. Inoltre, la sovrapposizione delle cellule o le impurità mascherate influenzano la capacità di giudizio.
(D) agente sigillante
L'agente sigillante comunemente usato è il glicerolo, non deve essere autofluorescente, incolore e trasparente, la luminosità della fluorescenza a pH 8,5 ~ 9,5 quando è più luminosa, non è facile da sbiadire rapidamente. Pertanto, vengono comunemente utilizzati glicerina e 0,5 mol/l pH9,0 ~ 9,5 del tampone carbonato con la stessa quantità di miscela per il sigillante.
(E) olio per specchi
Microscopio generale a fluorescenza in campo scuro e osservazione di campioni con specchio ad olio, è necessario utilizzare olio per specchi, * buon uso di olio speciale per specchi non fluorescente, può essere utilizzato anche al posto del glicerolo di cui sopra, è possibile utilizzare anche paraffina liquida, ma l'indice di rifrazione è inferiore , la qualità dell'immagine risulta leggermente compromessa.
