Parametri tecnici del microscopio confocale
1 risoluzione
La distribuzione della funzione di diffusione del punto del sistema del microscopio confocale è uguale alla convoluzione della lente dell'obiettivo e alla distribuzione dell'energia dell'immagine del punto. Nel caso della stessa lente obiettivo, la sua risoluzione laterale (piano xy) è 1,4 volte superiore a quella dei microscopi ottici tradizionali, raggiungendo 0.4λ/NA. Ad esempio, la risoluzione del TcS-NT di Leica è 0.18 μm. Dal principio del microscopio confocale, sappiamo che l'impostazione del foro stenopeico sul rilevatore non solo sopprime efficacemente l'interferenza dell'immagine del punto fuori fuoco rispetto all'immagine del piano di rilevamento, ma sopprime anche l'interferenza del non rilevamento punto sul piano quasi fuoco al punto di rilevamento, che migliora notevolmente la risoluzione dell'immagine. Inoltre, per ottenere una risoluzione estrema, i sistemi di microscopio confocale devono essere dotati di un tavolino resistente alle vibrazioni.
2 Sensibilità
I microscopi ottici tradizionali sono spesso dotati di camere CCD per raccogliere immagini, ma a causa della sensibilità relativamente bassa dei CCD, non è possibile rilevare la luce a bassa illuminazione come la fluorescenza, quindi i tubi fotomoltiplicatori sono generalmente utilizzati come elementi di rilevamento nei sistemi di microscopio confocale. Molto più del CCD, può anche mostrare un'elevata sensibilità ai deboli segnali fluorescenti.
3 Risoluzione orizzontale
I sistemi di microscopia confocale rivelano maggiori dettagli nelle immagini ingrandite rispetto alla microscopia ottica convenzionale. L'ingrandimento qui citato non si riferisce all'ingrandimento fisico, ma si riferisce ai dettagli morfologici dell'immagine visualizzata dal microscopio confocale nelle stesse condizioni di ingrandimento della lente dell'obiettivo, che è difficile da vedere al microscopio ottico tradizionale, quindi l'immagine è più chiaro e sottile. La risoluzione orizzontale è maggiore.
4 Contrasto
Poiché la luce di illuminazione dell'oggetto è solo un punto luminoso focalizzato molto piccolo nella scansione e la luminosità e il rapporto segnale-rumore sono elevati, la luce del segnale è più forte di altri punti dell'oggetto. Sul piano dell'immagine, il rivelatore puntiforme può ricevere solo la luce che passa attraverso il foro stenopeico, mentre la luce parassita proveniente da altre parti dell'oggetto viene filtrata perché non può essere focalizzata sul foro stenopeico confocale. Ciò si traduce in immagini a contrasto più elevato di campioni ottenuti con microscopi a scansione confocale rispetto ai microscopi convenzionali.
