Confronto tra microscopia confocale e microscopia ottica convenzionale
Il microscopio è lo strumento principale per osservare le cellule. In base alle diverse sorgenti luminose, può essere suddiviso in due categorie: microscopi ottici e microscopi elettronici. Il primo utilizza la luce visibile (il microscopio ultravioletto utilizza la luce ultravioletta) come sorgente luminosa, mentre il secondo utilizza il fascio di elettroni come sorgente luminosa. Sia i normali microscopi ottici che i microscopi confocali laser appartengono ai microscopi ottici.
Microscopio ottico ordinario
Un comune microscopio biologico è costituito da tre parti, vale a dire: ① sistema di illuminazione, comprendente sorgente luminosa e condensatore; ② Il sistema di amplificazione ottica, costituito da un obiettivo e un oculare, è il corpo principale di un microscopio. Per eliminare l'aberrazione sferica e cromatica, sia l'oculare che l'obiettivo sono composti da complessi gruppi di lenti Dispositivo meccanico, utilizzato per fissare i materiali e facilitare l'osservazione.
La chiarezza dell'immagine di un microscopio non dipende solo dal suo ingrandimento, ma anche dalla sua risoluzione. La risoluzione si riferisce alla capacità di un microscopio (o di un occhio umano a una distanza di 25 cm dal bersaglio) di distinguere oggetti a piccoli intervalli. L'entità della risoluzione dipende dalla lunghezza d'onda della luce, dall'indice di apertura e dall'indice di rifrazione del mezzo. Si esprime come: R=0.61 λ/NANA=nsin /2, dove n=l'indice di rifrazione del mezzo; =angolo di apertura (l'angolo al quale il campione apre l'apertura della lente dell'obiettivo), NA=apertura numerica. L'angolo dello specchio è sempre inferiore a 180? Quindi il valore massimo di zui per sina/2 deve essere inferiore a 1.
L'indice di rifrazione del vetro utilizzato nella produzione di lenti ottiche è 1,65-1,78 e più l'indice di rifrazione del mezzo utilizzato è vicino a quello del vetro, meglio è. Per gli obiettivi a secco, il mezzo è l'aria e il rapporto di apertura è generalmente 0.05-0.95; La lente oleosa utilizza olio di cedro come mezzo e il rapporto di apertura può essere vicino a 1,5.
La lunghezza d'onda della luce ordinaria è {{0}} nm, quindi il valore di risoluzione del microscopio non sarà inferiore a 0,2 μ m e la risoluzione dell'occhio umano è 0,2 mm. Pertanto, l'ingrandimento massimo per la progettazione del microscopio è solitamente 1000X.
