La struttura e i componenti principali di un microscopio a fluorescenza
(1) Sorgente luminosa
Al giorno d'oggi, come sorgente luminosa viene comunemente utilizzata una lampada al mercurio ad altissima pressione da 200 W. È fatto di vetro al quarzo, con una forma sferica al centro e al suo interno è riempita una certa quantità di mercurio. Durante il funzionamento, la scarica tra i due elettrodi provoca l'evaporazione del mercurio e la pressione all'interno della sfera aumenta rapidamente. Quando il mercurio evapora completamente, può raggiungere le 50-70 pressioni atmosferiche standard, che generalmente richiedono circa 5-15 minuti. La luminescenza delle lampade al mercurio ad altissima pressione è il risultato della scarica tra gli elettrodi, che dissocia e riduce continuamente le molecole di mercurio ed emette fotoni. Emette una forte luce ultravioletta e blu-viola, sufficiente per eccitare varie sostanze fluorescenti, pertanto è ampiamente utilizzato nei microscopi a fluorescenza.
Anche le lampade al mercurio ad altissima pressione emettono una grande quantità di energia termica. Pertanto, la stanza della lampada deve avere buone condizioni di dissipazione del calore e la temperatura dell'ambiente di lavoro non deve essere troppo elevata.
La nuova lampada al mercurio ad altissima pressione non richiede alta tensione per accendersi nelle prime fasi di utilizzo. Dopo un certo periodo di utilizzo è necessario avviarlo con l'alta tensione (circa 15000 V). Dopo l'avvio, la tensione di lavoro viene generalmente mantenuta a 50-60V e la corrente di lavoro è di circa 4 A. La durata media di una lampada al mercurio ad altissima pressione da 200 W è di circa 200 ore se utilizzata per 2 ore ogni volta. Minore è il tempo di funzionamento, minore è la durata. Se utilizzato solo per 20 minuti una volta, la durata si riduce del 50%. Pertanto, provare a ridurre al minimo il numero di avvii durante l'utilizzo. L'efficienza luminosa di una lampadina diminuisce gradualmente durante l'uso. Dopo che la luce si spegne, è necessario attendere il raffreddamento prima di riavviarsi. Dopo aver acceso la lampadina, non spegnerla immediatamente per evitare un'evaporazione incompleta del mercurio e danni all'elettrodo. Generalmente è necessario attendere 15 minuti. A causa dell'alta pressione e della forte radiazione ultravioletta della lampada al mercurio ad altissima pressione, la lampadina deve essere posizionata nella camera della lampada prima di essere accesa per evitare lesioni agli occhi ed esplosioni durante il funzionamento.
Il circuito di una sorgente luminosa con lampada al mercurio ad altissima pressione (100 W o 200 W) e i suoi componenti, tra cui trasformazione di tensione, soppressione di corrente e avvio. È presente un sistema per regolare il centro luminoso della lampadina nel vano lampada, con un riflettore concavo placcato in alluminio installato dietro la lampadina e una lente per la raccolta della luce installata nella parte anteriore.
La lampada al mercurio ad altissima pressione di produzione nazionale GCQ-200 ha buone prestazioni e può sostituire le lampadine importate come HBO-200, con una durata media di oltre 200 ore e un prezzo relativamente basso.
Un dispositivo semplice e portatile con sorgente luminosa fluorescente al bromo-tungsteno ad alta temperatura di colore sviluppato in Cina, con volume ridotto, peso leggero, basso consumo, doppio uso di CA e CC (con alimentatore CC integrato), facile da trasportare, comodo da usare , è stato promosso e applicato.
(2) Sistema di filtraggio del colore
Il sistema di filtri colorati è una parte importante di un microscopio a fluorescenza, costituito da una piastra filtrante di eccitazione e una piastra filtrante di compressione. Il modello della piastra filtrante spesso non è lo stesso tra i produttori. Le piastre filtranti prendono generalmente il nome dalla tonalità di colore di base, con la prima lettera che rappresenta la tonalità di colore, la seconda lettera che rappresenta il vetro e il numero che rappresenta le caratteristiche del modello. Microscopio Olimpo
(3) Lente dell'obiettivo
È possibile applicare varie lenti dell'obiettivo, ma l'uso di lenti dell'obiettivo acromatiche è adatto per la fluorescenza a causa della loro autofluorescenza e prestazioni di trasmittanza (intervallo di lunghezze d'onda) estremamente basse. Dato che la luminosità della fluorescenza dell'immagine nel campo visivo del microscopio è direttamente proporzionale al quadrato del rapporto di apertura della lente dell'obiettivo e inversamente proporzionale al suo ingrandimento, al fine di migliorare la luminosità dell'immagine in fluorescenza, una lente dell'obiettivo con un rapporto di apertura maggiore dovrebbe essere utilizzato. Soprattutto ad alto ingrandimento, il suo impatto è molto significativo. Pertanto, per campioni con fluorescenza insufficiente, è opportuno utilizzare un obiettivo con un'apertura elevata, combinato con un oculare il più basso possibile (4 x, 5 x, 6,3 x, ecc.).
(4) Specchio riflettente
Lo strato riflettente di un riflettore è generalmente placcato in alluminio perché l'alluminio assorbe meno luce ultravioletta e visibile nella regione blu viola, con una riflessione superiore al 90%, mentre l'argento riflette solo il 70%; Generalmente vengono utilizzati riflettori piatti.
(5) Specchio faretto
Il concentratore progettato e realizzato appositamente per la microscopia a fluorescenza è realizzato in vetro di quarzo o altro vetro che trasmette la luce ultravioletta. Esistono due tipi di osservatori di campo oscuro con campo visivo distinto. C'è anche un concentratore di fluorescenza differenziale.
(6) Dispositivo luce cadente
Il nuovo tipo di dispositivo a luce cadente riflette le parti di lunghezza d'onda più corte (ultravioletto e blu viola) dalla sorgente luminosa al filtro dello spettrofotometro di interferenza grazie alle proprietà del rivestimento del filtro. Quando il filtro è rivolto verso la sorgente luminosa con un angolo di 45 gradi. Quando inclinato, viene diretto verticalmente verso la lente dell'obiettivo e diretto verso il campione attraverso la lente dell'obiettivo, provocando l'eccitazione del campione. A questo punto, la lente dell'obiettivo funge direttamente da condensatore. Allo stesso tempo, le parti lunghe del filtro (verde, giallo, rosso, ecc.) sono trasparenti al filtro, quindi non si riflettono nella direzione dell'obiettivo. Il filtro agisce come una piastra filtrante di eccitazione e, poiché la fluorescenza del campione si trova nella regione della lunghezza d'onda lunga della luce visibile, può essere osservata attraverso il filtro e raggiungere l'obiettivo. La luminosità dell'immagine in fluorescenza aumenta con l'ingrandimento ed è più forte della sorgente di luce trasmessa ad alto ingrandimento. Oltre alla sua funzione di sorgente luminosa trasmissiva, è più adatto per l'osservazione diretta di campioni opachi e semitrasparenti, come piastre spesse, membrane filtranti, colonie, campioni di colture di tessuti, ecc. Negli ultimi anni, i microscopi a fluorescenza di nuova concezione spesso utilizzare dispositivi a luce cadente, noti come microscopi a fluorescenza a luce cadente.
