Parametri tecnici e capacità di utilizzo del microscopio a fluorescenza
Parametri tecnici del microscopio a fluorescenza 1. Oculare grandangolare 2. Obiettivo acromatico 3. Convertitore obiettivo a quattro fori 4. Dispositivo di fluorescenza a caduta Sistema di eccitazione blu (B) verde (G) 100W lampada al mercurio 5. Coassiale grossolano meccanismo di micro messa a fuoco: campo di messa a fuoco 15 mm Valore micro griglia 0,002 mm 6. Campo di movimento longitudinale del banco da lavoro meccanico a doppio strato: 70 mm Campo di movimento laterale: 50 mm
Parametri tecnici del microscopio a fluorescenza
1. Oculare grandangolare
2. Obiettivo acromatico
3. Convertitore obiettivo a quattro fori
4. Dispositivo a fluorescenza discendente Blu (B) Verde (G) Sistema di eccitazione Lampada al mercurio da 100 W
Meccanismo di micro messa a fuoco grossolana coassiale: campo di messa a fuoco: 15 mm, valore della micro griglia: 0.002 mm
6. Banco da lavoro meccanico a doppio strato
Campo di movimento longitudinale: 70 mm Campo di movimento laterale: 50 mm
Suggerimenti e metodi per l'utilizzo della microscopia a fluorescenza
(1) Diapositiva
Lo spessore della diapositiva deve essere compreso tra 0,8 e 1,2 mm. Se il vetrino è troppo spesso, da un lato assorbe troppa luce e dall'altro non può causare la raccolta della luce di eccitazione sul campione. Il vetrino deve essere liscio e pulito, con uno spessore uniforme e senza significativa fluorescenza spontanea. A volte sono necessari vetrini al quarzo.
(2) Vetro di copertura
Lo spessore del vetro di copertura è di circa 0,17 mm ed è liscio e pulito. Per migliorare l'eccitazione, è possibile utilizzare anche un vetro di copertura per interferenza. Si tratta di uno speciale vetro di copertura rivestito con diversi strati di sostanze (come il fluoruro di magnesio) che hanno diversi effetti di interferenza su diverse lunghezze d'onda della luce. Può consentire alla fluorescenza di passare uniformemente, riflettendo l'eccitazione, che può eccitare il campione.
(3) Esemplare
Le sezioni di tessuto o altri campioni non devono essere troppo spesse. Ad esempio, se sono troppo spesse, la maggior parte della luce di eccitazione viene consumata nella parte inferiore del campione, mentre la parte superiore osservata direttamente dalla lente dell'obiettivo non è sufficientemente eccitata. Inoltre, la sovrapposizione cellulare o il mascheramento delle impurità possono influenzare il giudizio.
(4) Agente di montaggio
La glicerina è comunemente usata come agente di montaggio e deve essere priva di fluorescenza spontanea, incolore e trasparente. La luminosità della fluorescenza è più luminosa a pH da 8,5 a 9,5 e non è facile svanire rapidamente. Pertanto, una miscela equivalente di glicerolo e 0.5 mol/l di soluzione tampone di carbonato con un pH da 9.0 a 9.5 viene comunemente utilizzata come agente di montaggio.
(5) Olio per specchi
Generalmente, quando si utilizzano un microscopio a fluorescenza in campo oscuro e un microscopio ad olio per osservare i campioni, è necessario utilizzare olio per lenti. È preferibile utilizzare uno speciale olio per lenti non fluorescente, che può essere sostituito anche dal suddetto glicerolo. È possibile utilizzare anche la paraffina liquida, ma l'indice di rifrazione è basso, il che ha un leggero impatto sulla qualità dell'immagine.
