Metodi di preparazione dei campioni al microscopio ottico ed elettronico
I metodi di preparazione microscopica comprendono generalmente quattro categorie: metodo di sezionamento, metodo di montaggio intero, metodo di striscio e metodo di pastigliatura.
①Metodo di affettatura. Lo spessore della fetta di un microscopio ottico è compreso tra 2 e 25 micron. In generale, è appropriato uno spessore della fetta di circa 10 micron per materiali animali e vegetali. I metodi di sezionamento variano a seconda del mezzo di inclusione. Comunemente utilizzati sono il metodo di sezionamento in paraffina, il metodo di sezionamento colloidale di cotone, il metodo di sezionamento congelato e il metodo di glicole etilenico metacrilato (denominato metodo GMA). Il metodo di sezionamento in paraffina comprende fasi quali fissazione, inclusione, sezionamento, colorazione, disidratazione e montaggio. La chiave è incorporare il materiale biologico in paraffina, utilizzare la paraffina come supporto e tagliare il materiale biologico immerso nel blocco di cera in fette sottili ideali. Il processo operativo è: fissazione → lavaggio con acqua → disidratazione dell'alcol passo dopo passo da bassa concentrazione ad alta concentrazione → trasparenza allo xilene → immersione in cera → inclusione → sezionamento → cerotto → deparaffinazione allo xilene → trattamento alcolico passo dopo passo da alta concentrazione a bassa concentrazione. Infine, passa all'acqua → tintura → disidratazione graduale da alcol a bassa concentrazione ad alta concentrazione → trasparenza allo xilene → sigillatura con colla in resina. I passaggi fondamentali sono gli stessi per tutte le tecniche di produzione.
②Metodo di sigillatura integrale. Metodo di preparazione a montaggio completo per singole cellule, piccoli organismi o organi dispersi. Questo metodo richiede anche varie fasi di fissazione, colorazione, disidratazione, trasparenza e montaggio. Questo metodo viene utilizzato per preparare i parameci e l'apparato boccale degli insetti.
③Metodo dello striscio. Un metodo di preparazione in cui campioni biologici facilmente disperdibili vengono sparsi su un vetrino. Uno striscio di sangue è un esempio.
④Metodo di pressione della tavoletta. Posizionare i tessuti naturali e facilmente disperdibili o i tessuti che si disperdono facilmente dopo la lavorazione, come spermatociti animali e cellule dell'apice della radice, su un vetrino, aggiungere un vetrino coprioggetto e schiacciare il tessuto con forza per formare le cellule o le cellule all'interno. La struttura è diffusione in uno strato del metodo di produzione. Il metodo della pressatura viene spesso utilizzato per osservare i cromosomi, solitamente colorati con acetato magenta, rosso lichene e fucsina fenica.
