Fondamenti di microscopia a contrasto di fase
Il microscopio a contrasto di fase è un microscopio speciale che converte la differenza del percorso ottico (cioè la differenza di fase) generata quando la luce passa attraverso i dettagli di campioni trasparenti in una differenza di intensità della luce.
Quando la luce passa attraverso un campione relativamente trasparente, né la lunghezza d'onda (colore) né l'ampiezza (luminosità) della luce cambiano sensibilmente. Pertanto, quando si osservano campioni non colorati (come le cellule viventi) con la normale microscopia ottica, la loro morfologia e struttura interna sono spesso difficili da distinguere. Tuttavia, a causa della differenza nell'indice di rifrazione e nello spessore delle varie parti della cella, quando la luce passa attraverso tale campione, il percorso ottico della luce diretta e della luce diffratta sarà diverso. Quando la distanza ottica aumenta o diminuisce, la fase delle onde luminose in accelerazione o in ritardo cambia (creando una differenza di fase). La differenza di fase della luce non può essere percepita ad occhio nudo, ma il microscopio a contrasto di fase può utilizzare il fenomeno di interferenza della luce attraverso il suo speciale dispositivo-diaframma anulare e piastra di fase, per convertire la differenza di fase della luce in una differenza di ampiezza (luce e scuro) che può essere percepito dagli occhi umani Scarso), in modo che gli oggetti trasparenti originali mostrino evidenti differenze di luce e ombra e il contrasto sia migliorato, in modo da poter osservare chiaramente cellule viventi e cellule in cellule che non possono essere viste o chiaramente visto sotto normali microscopi ottici e microscopi a campo oscuro. determinate strutture fini.
Il principio di imaging del microscopio a contrasto di fase: durante l'ispezione al microscopio, la sorgente luminosa può passare solo attraverso l'anello trasparente del diaframma anulare, quindi converge in un raggio dopo essere passato attraverso il condensatore. Grado di deflessione (diffrazione). L'immagine formata dall'anello trasparente cade appena sul piano focale posteriore della lente dell'obiettivo e coincide con il piano coniugato sul piatto di fase. Pertanto, la luce diretta non deviata passa attraverso il piano coniugato, mentre la luce diffratta deviata passa attraverso il piano di compensazione. A causa delle diverse proprietà della superficie coniugata e della superficie di compensazione sul piatto di fase, produrranno una certa differenza di fase e indeboliranno l'intensità della luce che passa rispettivamente attraverso le due parti, e i due gruppi di luce convergeranno sullo stesso percorso ottico dopo la convergenza della lente posteriore. La luce diretta e la luce diffratta producono interferenze luminose e la differenza di fase viene trasformata in una differenza di ampiezza. In questo modo, quando si ispeziona il microscopio a contrasto di fase, la luce che passa attraverso il corpo trasparente incolore converte la differenza di fase che non può essere distinta dall'occhio umano in una differenza di ampiezza (differenza di luce e buio) che l'occhio umano può distinguere.
