Procedura sperimentale per il metodo di conteggio al microscopio microbiologico diretto
1. Diluizione
Sospensione di Saccharomyces cerevisiae per un'adeguata diluizione, il liquido batterico, se non denso, non può essere diluito.
2. Ispezione dello specchio della camera di conteggio
Prima di aggiungere i campioni, ispezionare innanzitutto la camera di conteggio della piastra di conteggio. Se è presente dello sporco, è necessario pulirlo prima del conteggio.
3. Aggiunta del campione
Una piastra di ematocrito pulita e asciutta coperta con un coprioggetto, quindi una buretta asettica a bocca fine verrà diluita con il liquido di lievito di birra dal bordo del coprioggetto (non dovrebbe esserci una quantità eccessiva), in modo che il liquido batterico lungo lo spazio attraverso l'infiltrazione capillare all'interno la camera di conteggio, la camera di conteggio generale può essere riempita con liquido batterico. Tieni presente che non dovrebbero esserci bolle d'aria.
4. Conteggio al microscopio
Dopo aver riposato per 5 minuti, posizionare la piastra per il conteggio del sangue sul piano portante del microscopio, individuare prima la posizione della camera di conteggio con un ingrandimento basso, quindi passare all'ingrandimento elevato per il conteggio. Se il fluido batterico risulta essere troppo denso o troppo fluido prima del conteggio, è necessario regolare nuovamente la diluizione prima del conteggio. Generalmente, la diluizione del campione richiede circa 5-10 organismi in ciascuna piccola cellula. Per ciascuna camera di conteggio vengono contati gli organismi nei 5 compartimenti centrali (è possibile selezionare 4 angoli e il centro del compartimento centrale). I batteri situati sulle linee della griglia vengono generalmente contati solo sulle linee superiore e destra. Nel caso del lievito in erba, vengono contati due organismi se il corpo in erba è grande la metà della cellula madre. Contare un campione dalle due camere di conteggio per contare il valore per calcolare il contenuto batterico del campione.
5. Pulizia della piastra dell'ematocrito
Dopo l'uso, la piastra per il conteggio delle cellule del sangue nella gabbia dell'acqua con una colonna d'acqua risciacqua, non utilizzare oggetti duri per lavare e spazzolare, lavare e asciugare o asciugare con un asciugacapelli. Ispezionare al microscopio la piastra e osservare se sono presenti organismi residui o altri precipitati in ciascun piccolo compartimento. Se non è pulito, il lavaggio dovrà essere ripetuto finché non sarà pulito.
