Perché ho bisogno di un microscopio confocale?
1. Il microscopio ottico è stato perfezionato grazie agli sforzi e ai miglioramenti dei nostri grandi predecessori. Infatti, il normale microscopio può fornirci bellissime immagini microscopiche in modo facile e veloce. Tuttavia, l'evento che ha rivoluzionato il mondo dei microscopi quasi perfetti è stata l'invenzione del "microscopio confocale a scansione laser". Questo nuovo tipo di microscopio è caratterizzato da un sistema ottico che estrae le informazioni dell'immagine solo dalla superficie su cui è concentrato il fuoco e, variando la messa a fuoco e recuperando le informazioni acquisite nella memoria immagine, è possibile ottenere un'immagine nitida con informazioni 3-dimensionali complete. In questo modo è possibile ottenere facilmente informazioni sulla forma della superficie che non possono essere confermate con un microscopio convenzionale. Inoltre, mentre "l'aumento della risoluzione" e la "profondità di campo più profonda" sono condizioni contrastanti per i microscopi ottici convenzionali, soprattutto ad alto ingrandimento, questo problema viene risolto con i microscopi confocali.
2. Vantaggi del sistema ottico confocale
Il sistema ottico confocale prevede un'illuminazione puntiforme del campione, mentre anche la luce riflessa viene ricevuta tramite un recettore puntiforme. Quando il campione viene posizionato nel punto focale, quasi tutta la luce riflessa raggiunge il fotorecettore e quando il campione è fuori fuoco, la luce riflessa non può raggiungere il fotorecettore. In altre parole, in un sistema ottico confocale viene emessa solo l'immagine che coincide con il punto focale, mentre i punti e la luce diffusa inutile vengono bloccati.
3. Perché usare un laser?
In un sistema ottico confocale, il campione viene illuminato in un punto e la luce riflessa viene ricevuta da un sensore puntiforme. Pertanto è necessaria una sorgente luminosa puntiforme. I laser sono una sorgente luminosa puntiforme. Nella maggior parte dei casi, la sorgente luminosa per i microscopi confocali è una sorgente luminosa laser. Inoltre, la monocromaticità, la direzionalità e l’eccellente forma del fascio dei laser sono ragioni importanti per la loro diffusa adozione.
4. È possibile l'osservazione in tempo reale basata sulla scansione ad alta velocità.
Per la scansione laser viene utilizzata un'unità di deflessione ottico-acustica (Acoustic Optical Deflector, AO prime) in direzione orizzontale, mentre in direzione verticale viene utilizzato uno specchio di scansione del raggio controllato tramite servoelettronica (Servo Galvano-mirror). Poiché non sono presenti vibrazioni meccaniche nel deflettore AO, è possibile la scansione ad alta velocità e l'osservazione in tempo reale sullo schermo del monitor. L'elevata velocità di questa fotocamera è un elemento molto importante che influisce direttamente sulla velocità di messa a fuoco e di recupero della posizione.
