Quali specifiche del campione sono necessarie per la microscopia ottica?
Nel processo di preparazione del campione del microscopio ottico, lo spessore della fetta del campione è compreso tra 2-25um; lo spessore della fetta del microscopio elettronico è compreso tra 50-100nm (eccetto per il microscopio elettronico ad alta tensione, il cui spessore del campione può raggiungere 1um), quindi il metodo della fetta utilizzato non è tutto uguale.
In termini di vettore, il vettore della sezione del microscopio ottico è il vetrino, mentre il vettore della sezione del microscopio elettronico è la griglia.
In termini di fissazione, le fette del microscopio ottico vengono fissate con un fissativo composto, mentre le fette del microscopio elettronico vengono fissate ripetutamente con un unico fissativo.
In termini di colorazione, la colorazione dei campioni ottici è relativamente semplice. Secondo diversi campioni di osservazione e tipi di microscopi ottici, di solito è sufficiente colorare con alcuni agenti coloranti fissi. Esistono molti e complicati metodi per ricolorare i campioni al microscopio elettronico, come la colorazione negativa, la colorazione con argento e così via.
In termini di inclusione, paraffina, collodio, gelatina, ecc. sono usati come agenti di inclusione per sezioni di microscopio ottico; resina epossidica, resina di polistirene, resina di isobutilene e resina idrosolubile vengono utilizzate come agenti di inclusione per sezioni di microscopio elettronico.
Per garantire che il campo visivo del microscopio possa essere uniformemente e completamente illuminato, il sistema ottico di illuminazione deve essere regolato quando il microscopio viene installato e messo a punto per la prima volta. Questo è un mezzo importante e il modo più basilare per utilizzare correttamente il microscopio e ottenere risultati corretti e affidabili. requisiti. Inoltre, padroneggiare correttamente la regolazione del sistema di percorso ottico dell'illuminazione è un passo necessario dopo aver sostituito la lampadina della sorgente luminosa durante l'uso del microscopio, ed è anche un mezzo necessario per controllare le prestazioni del microscopio di volta in volta durante l'uso quotidiano utilizzo. La regolazione del sistema di percorso ottico dell'illuminazione del microscopio comprende principalmente i seguenti quattro elementi: 1. Regolazione preliminare della camera della lampada della sorgente luminosa all'esterno del microscopio ① Aprire prima il guscio della camera della lampada, premere la clip a molla per inserire la lampadina alogena nel presa ed evitare il contatto diretto con la lampadina con le dita durante l'installazione (può essere separato da un panno morbido o carta) per evitare Ci sono impronte digitali e altro sporco sulla lampadina, che influirà sulla durata della lampadina. ②Metti l'alloggiamento della lampada sul tavolo, dopo aver acceso l'alimentazione, usa un cacciavite speciale per regolare il foro della manopola di messa a fuoco della lampada (contrassegnato con "←→"), in modo che il filamento sia proiettato sul muro 1-2 m di distanza e l'immagine del filamento viene regolata. Quindi regolare l'altezza della lampada e regolare il foro filettato (contrassegnato con "──") per rendere appropriata la posizione del filamento; quindi regolare la posizione sinistra e destra della lampada per regolare il foro della vite (contrassegnato con "──") per rendere appropriata la posizione sinistra e destra del filamento.
2. Lo scopo del controllo e della correzione della posizione dell'illuminante della sorgente luminosa (filamento) nel microscopio è quello di regolare l'estremità dell'immagine dell'illuminante esattamente nel campo visivo della lente dell'obiettivo e di garantire che il campo visivo di il microscopio è completamente e uniformemente illuminato dal punto di vista della sorgente luminosa. Illuminazione, che è un prerequisito per la regolazione del sistema di illuminazione Kuhler. Strumenti di base necessari: Il telescopio di centraggio viene fornito al momento dell'acquisto del microscopio. ① Scollegare il manicotto di vetro smerigliato nell'alloggiamento della lampada e rimettere l'alloggiamento della lampada sul microscopio. ② Scegli una lente dell'obiettivo 10×, attiva il programma della sorgente luminosa per trovare il campione e metterlo a fuoco chiaramente, quindi usa una lente dell'obiettivo 40× per mettere a fuoco chiaramente il campione (lente dell'obiettivo 40× Puoi vedere l'intera immagine del filamento ); ③ Aprire al massimo il diaframma di apertura e il diaframma di campo del condensatore; ④ Scollegare uno degli oculari, sostituirlo con un telescopio di centraggio, afferrare la parte bianca, allungare l'oculare nero con l'altra mano, è possibile vedere l'immagine del filamento nel campo visivo; ⑤ Se la posizione del filamento non è adatta, regolare il foro "──" per regolare l'immagine del filamento in direzione orizzontale e regolare il foro "──" per regolare l'immagine del filamento in direzione verticale finché Regola l'immagine del filamento alla leggera immagine circolare che riempie appena l'apertura della lente dell'obiettivo; ⑥ Dopo la regolazione, reinserire il manicotto di vetro smerigliato nella posizione originale, scollegare il telescopio di centraggio e sostituire l'oculare per la regolazione successiva. La suddetta regolazione dell'illuminazione della camera della lampada della sorgente luminosa all'esterno del microscopio e la verifica della posizione del corpo luminoso della sorgente luminosa all'interno del microscopio devono essere eseguite solo quando il microscopio viene installato e messo a punto per la prima volta e quando la lampadina viene sostituita e il microscopio non può essere regolato in modo casuale quando si utilizza il microscopio. In caso di confusione, può essere riportato allo stato originale secondo i passaggi precedenti.
3. Corretta regolazione del sistema di illuminazione Kohler Uno dei compiti principali della corretta regolazione del microscopio è la regolazione del sistema di illuminazione del percorso ottico, e la chiave è la regolazione del sistema di illuminazione Kohler. Per ogni persona che usa un microscopio, specialmente quelli che fanno fotomicrografie, dovrebbero avere una certa comprensione e padronanza del principio del sistema di illuminazione di Kuhler e dei suoi passaggi di regolazione per dare pieno gioco alle funzioni del microscopio e scattare foto. Le foto che escono possono essere più coerenti e perfette nell'effetto. Il principio del sistema di illuminazione Kohler è semplice: la luce emessa da qualsiasi punto sull'illuminante della sorgente luminosa può illuminare il campo visivo del microscopio e la luce emessa da ciascun punto sull'illuminante della sorgente luminosa viene raccolta e nel campo di vista del microscopio Si ottiene un'illuminazione molto piena e uniforme. Lo scopo della regolazione del sistema di illuminazione Kuhler è ottenere un'illuminazione uniforme e sufficiente per il campo visivo osservato e impedire che la luce diffusa influisca o interferisca con il sistema di imaging, in modo da evitare l'appannamento della pellicola durante la fotografia. Componenti necessari per un sistema di illuminazione Kohler ad alta regolazione: diaframma di campo, sistema di lenti a condensatore che possono essere regolate in asse. ① Seleziona l'obiettivo 10× e l'oculare 10× ② Metti la lente anteriore del condensatore nel percorso ottico, regola il diaframma di apertura su una posizione moderata (non troppo grande o piccola), quindi solleva il condensatore al posizione superiore e regolare la piattaforma girevole del condensatore sulla posizione "J" del campo luminoso ③ Regolare il diaframma di campo al minimo (0,1)
④ Metti il campione biologico sigillato sul palco, accendi la sorgente luminosa e metti a fuoco chiaramente
⑤ Ci sarà un'area parzialmente illuminata o un punto luminoso nel campo visivo, che è l'immagine sfocata del diaframma di campo, in cui si possono vedere chiaramente i dettagli del campione; all'esterno è un campo visivo più scuro, che potrebbe non necessariamente vedere chiaramente i dettagli del campione
⑥ Regola leggermente il condensatore verso il basso, in modo che il punto luminoso nel campo visivo si riduca gradualmente e diventi gradualmente un'immagine poligonale chiara, che è l'immagine chiara del diaframma di campo;
⑦ Generalmente, l'immagine poligonale non è al centro del campo visivo ed è necessario regolare una coppia di viti di centraggio del condensatore per regolare l'immagine poligonale del diaframma di campo nella posizione centrale;
⑧Aprire gradualmente il diaframma del campo visivo per rendere l'immagine del poligono un poligono inscritto del campo visivo e controllare ulteriormente lo stato di allineamento. Se l'allineamento non è ideale, continuare a regolare con precisione la vite di allineamento;
⑨Aprire leggermente il diaframma del campo visivo, in modo che la sua immagine poligonale scompaia appena sul bordo del campo visivo. Finora, la regolazione del sistema di illuminazione Kohler è stata completata. Dopo che il sistema di illuminazione Kohler è stato regolato, l'intero campo visivo è uniformemente illuminato e le micrografie scattate sono luminose e chiare con contrasto normale.
