Qual è la differenza tra microscopio a fluorescenza e microscopio invertito?
Il microscopio è uno strumento importante nella coltura cellulare e nei relativi esperimenti derivati. Attualmente esistono sul mercato vari tipi di microscopi. È una sfida scegliere un microscopio che soddisfi le tue esigenze e sia adatto. Quanto segue introduce i principi dei microscopi invertiti e dei microscopi a fluorescenza, in modo che tu possa scegliere facilmente.
La composizione di un microscopio invertito è la stessa di un normale microscopio e comprende principalmente tre parti: una parte meccanica, una parte di illuminazione e una parte ottica.
La composizione di un microscopio invertito è la stessa di un normale microscopio verticale, tranne per il fatto che la lente dell'obiettivo e il sistema di illuminazione sono invertiti, il primo è sotto il tavolino e il secondo è sopra il tavolino.
Questa struttura consente di ampliare notevolmente la distanza effettiva tra il sistema di concentrazione dell'illuminazione e il tavolino, il che è conveniente per posizionare oggetti più spessi da osservare come piastre di Petri e fiasche per colture cellulari (ovviamente sono accettabili anche vetrini). La distanza di lavoro tra loro non deve essere molto grande.
Il microscopio invertito viene utilizzato per l'osservazione di microrganismi, cellule, batteri, colture di tessuti, sospensioni, sedimenti, ecc. in unità mediche e sanitarie, college e università e istituti di ricerca. Può osservare continuamente il processo di riproduzione e divisione di cellule e batteri nel mezzo di coltura e può fotografare qualsiasi forma di questo processo.
È ampiamente utilizzato in citologia, parassitologia, oncologia, immunologia, ingegneria genetica, microbiologia industriale, botanica e altri campi.
La microscopia a fluorescenza viene utilizzata per studiare l'assorbimento, il trasporto, la distribuzione e la localizzazione di sostanze chimiche nelle cellule.
Per l'oggetto da ispezionare, ci sono due modi per generare fluorescenza: autofluorescenza, che emette fluorescenza direttamente dopo l'irradiazione ultravioletta; fluorescenza secondaria, che può emettere fluorescenza dopo che l'oggetto da osservare è stato trattato con coloranti fluorescenti e quindi irradiato con luce ultravioletta.
Alcune sostanze nelle cellule, come la clorofilla, producono autofluorescenza dopo essere state irradiate dai raggi ultravioletti; alcune sostanze non possono emettere fluorescenza da sole, ma se sono colorate con coloranti fluorescenti o anticorpi fluorescenti, possono anche emettere fluorescenza secondaria dopo essere state irradiate dai raggi ultravioletti.
Il microscopio a fluorescenza utilizza una sorgente di luce puntiforme ad alta efficienza luminosa ed emette luce di una certa lunghezza d'onda (luce ultravioletta 365 nm o luce blu viola 420 nm) attraverso il sistema di filtri colorati come luce di eccitazione, dopo aver eccitato le sostanze fluorescenti nel campione per emetterle vari colori di fluorescenza, quindi Osservare mediante ingrandimento dell'obiettivo e degli oculari.
Sotto lo sfondo a forte contrasto, anche se la fluorescenza è molto debole, è facile da identificare e ha un'elevata sensibilità. Viene utilizzato principalmente per lo studio della struttura e della funzione delle cellule e della composizione chimica.
