Cosa fa un microscopio a fluorescenza
I microscopi a fluorescenza utilizzati per applicazioni di ricerca funzionano sulla base di una serie di filtri ottici:
Un filtro di eccitazione
un divisore di raggio
un filtro sulle emissioni
Questi filtri vengono generalmente inseriti insieme in un blocco filtro (microscopi composti) o in un recipiente piatto (principalmente stereomicroscopi).
Il filtro di eccitazione selezionerà la lunghezza d'onda per eccitare un particolare colorante all'interno del campione e il filtro di emissione funge da controllo di qualità, consentendo il passaggio solo della lunghezza d'onda emessa da un particolare fluoroforo. I filtri dicroici vengono utilizzati per riflettere la luce nella banda di eccitazione e far passare la luce nella banda di emissione per produrre la classica luce incidente a fluorescenza.
La fluorescenza è uno dei fenomeni fisici più comunemente utilizzati nella microscopia biologica e analitica, principalmente per la sua elevata sensibilità e specificità. La fluorescenza è una forma di luminescenza fredda.
La microscopia a fluorescenza consente anche all'utente di determinare la distribuzione e il numero delle singole specie molecolari e la loro posizione all'interno della cellula. È possibile effettuare lo studio della co-regionalizzazione e delle interazioni, delle concentrazioni di ioni nonché l'osservazione dei processi di citosi e citotossicità tra le cellule.
Con l'aiuto della microscopia a fluorescenza a super risoluzione è possibile acquisire immagini anche di strutture a sub-risoluzione.
