Tre tipi di osservazione al microscopio
I. Campo chiaro BF (Campo chiaro BF)
La BF in campo chiaro è un metodo familiare di microscopia, ampiamente utilizzato in patologia e nei test per l'osservazione di sezioni colorate, e tutti i microscopi sono in grado di svolgere questa funzione.
Campo luminoso
II. Campo scuro DF (campo scuro DF)
La DF in campo oscuro è in realtà l'illuminazione in campo oscuro. Si differenzia dal campo chiaro in quanto non osserva direttamente la luce illuminata, ma la luce riflessa o diffratta dall'oggetto in esame. Di conseguenza, il campo visivo diventa uno sfondo scuro, mentre l'oggetto esaminato appare come un'immagine luminosa.
Il principio del campo visivo oscuro si basa sul fenomeno Tyndall in ottica, la polvere in caso di forte luce attraverso la luce diretta, l'occhio umano non può essere osservata, ciò è dovuto alla forte luce attorno alla causa. Se la luce viene diretta obliquamente, le particelle sembrano aumentare di dimensioni a causa della riflessione della luce e diventano visibili all'occhio umano.
Un accessorio speciale richiesto per l'osservazione in campo scuro è un telescopio da osservazione. Si caratterizza nel non lasciare che il fascio luminoso attraversi l'oggetto esaminato dal basso verso l'alto, ma nel modificare il percorso della luce in modo che sia diretto obliquamente verso l'oggetto esaminato, in modo che la luce illuminante non entri direttamente nell'oggetto esaminato lente dell'obiettivo e un'immagine luminosa viene formata utilizzando la luce riflessa o diffratta dalla superficie dell'oggetto esaminato. La risoluzione dell'osservazione in campo scuro è molto più elevata dell'osservazione in campo chiaro, * fino a 0.02-0.004
Campo oscuro
III. Contrasto di fase PH
Nello sviluppo della microscopia ottica, l'invenzione di successo del contrasto di fase PH rappresenta un risultato importante nella moderna tecnologia della microscopia. Come sappiamo, l'occhio umano può distinguere solo la lunghezza d'onda (colore) e l'ampiezza (luminosità) delle onde luminose, per campioni biologici incolori e luminosi, quando la luce li attraversa, la lunghezza d'onda e l'ampiezza non cambiano molto, ed è difficile osservare il campione in campo chiaro.
Il microscopio a contrasto di fase utilizza la differenza della gamma luminosa dell'oggetto esaminato per l'esame microscopico, ovvero utilizza efficacemente il fenomeno dell'interferenza della luce per trasformare l'indistinguibile differenza di fase dell'occhio umano nella differenza di ampiezza distinguibile, e persino incolore e trasparente le sostanze possono diventare chiaramente visibili. Ciò facilita notevolmente l'osservazione delle cellule viventi, quindi la microscopia a contrasto di fase è ampiamente utilizzata nei microscopi invertiti.
Il principio di base della microscopia a contrasto di fase è che la differenza nel campo ottico della luce visibile trasmessa attraverso un campione viene trasformata in una differenza di ampiezza, aumentando così il contrasto tra le varie strutture e rendendole visibili. La luce viene rifratta attraverso il campione e devia dal percorso ottico originale, pur essendo ritardata di 1/4λ (lunghezza d'onda). Se 1/4λ viene nuovamente aumentato o diminuito, la differenza del campo ottico diventa 1/2λ e l'interferenza tra i due raggi della fotosintesi viene rafforzata dopo che gli assi dei due raggi vengono interferiti e l'ampiezza aumenta o diminuisce, quindi migliorando il contrasto. Nella struttura, il microscopio a contrasto di fase ha due caratteristiche speciali che differiscono dal normale microscopio ottico:
1. Il diaframma anulare (diaframma anulare) si trova tra la sorgente luminosa e il condensatore, il ruolo è quello di far passare la luce attraverso il condensatore per formare un cono di luce cavo, concentrandosi sul campione.
2. piastra di fase (piastra di fase anulare) nella lente dell'obiettivo rivestita con piastra di fase al fluoruro di magnesio, la luce diretta o diffratta può essere ritardata di fase 1/4λ. Ne esistono di due tipi:
1.Una piastra di fase: la luce diretta ritardata di 1/4 λ, due gruppi di onde luminose aggiunta di onde luminose coassiali, aumento di ampiezza, la struttura del campione rispetto al mezzo circostante è più luminosa, la formazione di contrasto luminoso (o contrasto negativo) .
Piastra di fase 2.B: la luce diffratta viene ritardata di 1/4 λ, i due gruppi di onde luminose dopo la fusione dell'asse dell'onda luminosa si riducono, l'ampiezza diventa più piccola, la formazione di contrasto scuro (o contrasto positivo ), la struttura è più scura del mezzo circostante.
