Il ruolo di ciascun filtro nella microscopia a fluorescenza
La questione più cruciale con la microscopia a fluorescenza è la combinazione di filtri, e sia il filtro di eccitazione che il filtro di schermatura devono essere adatti al corpo fluorescente osservato e abbinati tra loro. Per determinati scopi specifici, se si verifica un errore nella selezione di un filtro, ciò può portare a malintesi e persino a risultati errati. I risultati della tecnologia della microscopia a fluorescenza e l'uso di filtri di alta qualità e ingegnosi gruppi di filtri sono inseparabili. Esistono diversi tipi di filtri per la microscopia a fluorescenza.
1. Filtro assorbente di calore
Il filtro assorbente il calore è un filtro necessario per impedire che la radiazione termica nello spettro della sorgente luminosa danneggi il gruppo del dispositivo ottico. I primi microscopi avanzati erano dotati di bottiglie a forma di tamburo che potevano contenere acqua distillata come dispositivi di assorbimento del calore. I moderni microscopi per la ricerca su larga scala sono dotati di filtri in vetro che assorbono il calore in scatole o camere luminose con sorgente luminosa, che sono lastre di vetro trasparenti, leggermente gialle. I filtri Leitz KG1 (2 mm) e BG38 (4 mm) possono trasmettere quasi tutti gli spettri della luce ultravioletta e visibile, rendendoli filtri con un flusso luminoso fino al 98%. Assorbe selettivamente solo le linee di radiazione fototermica infrarossa.
2. Filtro di eccitazione
I filtri di eccitazione possono assorbire selettivamente linee spettrali a lunga lunghezza d'onda e trasmettere solo luce ultravioletta. I filtri per la luce viola, blu e verde sono filtri di eccitazione. Zeiss, Reichert, Olympus serie B, serie G, serie BG, serie Shott UG, Opton H, G, serie BP, Leitz serie BP e altri filtri sono tutti filtri di eccitazione.
3. Filtro di blocco
Il filtro di blocco è un filtro che assorbe selettivamente le linee spettrali a lunghezza d'onda corta e la radiazione infrarossa, consentendo all'osservatore di vedere la fluorescenza emessa dall'oggetto da testare proteggendo la cornea dai danni UV.
4. Filtro di separazione della luce colorata
Il filtro di separazione della luce colorata è un filtro che riflette la luce di eccitazione sull'oggetto da testare, facendo sì che l'oggetto emetta fluorescenza e quindi trasmette la fluorescenza all'oculare. Questo tipo di filtro può essere utilizzato solo nei concentratori a fascio cadente, mentre la microscopia a fluorescenza a luce di trasmissione non richiede la separazione dei colori.
5. Filtro antidisturbo
Il filtro interferenziale è un tipo di filtro di eccitazione ad alte prestazioni. È un filtro realizzato impilando diverse sottili pellicole metalliche tra due lastre di vetro lucido. L'indice di rifrazione di ciascuna pellicola metallica sottile è diverso, quindi le linee spettrali di diverse lunghezze d'onda della sorgente luminosa di illuminazione vengono riflesse ripetutamente su ciascuna pellicola metallica, causando la cancellazione di alcune lunghezze d'onda delle linee spettrali a causa di interferenze distruttive, mentre altre vengono rafforzate da interferenza additiva e trasmessa attraverso. Ciò si traduce in un filtro con uno spettro di trasmissione ristretto, un'ampiezza di mezzo picco di soli 6~20 nm e una trasmittanza del 60%~70%.
