Il metodo di preparazione dei vetrini per microscopio
1. Metodo dello striscio
Il metodo di spalmatura è un metodo per preparare i vetrini rivestendo uniformemente i materiali su di essi.
I materiali per lo striscio includono organismi uni-cellulari, piccole alghe, sangue, terreni di coltura batterica, tessuti sciolti di animali e piante, testicoli, antere, ecc.
Quando si imbratta, è necessario prestare attenzione a:
(1) Il vetrino deve essere pulito.
(2) Il vetrino deve essere piatto.
(3) Il rivestimento deve essere uniforme. Applicare la gocciolina al centro destra del vetrino e distribuirla uniformemente con una lama da dissezione o uno stuzzicadenti.
(4) Il rivestimento deve essere sottile. Utilizzando un altro vetrino come vetrino, spingere delicatamente da destra a sinistra lungo la superficie del vetrino con il liquido applicato (l'angolo tra i due vetrini deve essere compreso tra 30 e 45 gradi) e applicare uno strato sottile e uniforme.
(5) Fisso. Se è necessaria la fissazione, è possibile utilizzare fissativi chimici o metodi di essiccazione (batteri).
(6) Colorazione. I batteri utilizzano il blu di metilene e il sangue utilizza la soluzione colorante di Wright. La soluzione colorante dovrebbe coprire l'intera superficie del rivestimento.
(7) Risciacquare. Utilizzare carta assorbente per assorbire o asciugare.
(8) Sigillare la pellicola. Conservazione a lungo termine utilizzando la pellicola canadese per alberi.
2. Metodo di pressatura della compressa
Il metodo di compressione è un metodo per affettare materiali biologici posizionandoli tra un vetrino e un coperchio, applicando una certa pressione per disperdere le cellule dei tessuti.
Il processo generale del metodo di pressatura delle compresse:
(1) Selezione del materiale. Per osservare la divisione cellulare, è necessario selezionare come materiali cellule di tessuto fresco con divisione cellulare vigorosa. Come l'estremità della radice, il meristema dell'estremità dello stelo, le cellule del midollo osseo, le antere (cellule madri del polline). Nidi di sperma (spermatociti), ecc.
(2) Fisso. La fissazione del materiale può essere determinata in base alle esigenze e il campione deve essere immediatamente compresso e osservato. Non è necessario eseguire un trattamento di fissazione separato (sincrono con la colorazione); Se il materiale non viene ispezionato immediatamente dopo il campionamento, può essere fissato con un fissativo (solitamente fissativo alcolico a base di acido acetico). Dopo il fissaggio per 2-24 ore (a seconda del materiale), sciacquare con etanolo al 95% e conservare in etanolo al 70% per un uso successivo.
(3) Separazione. I materiali che non vengono facilmente dispersi dalle cellule devono essere trattati con una soluzione di separazione per idrolisi (come HCl 1N o sperma di acido cloridrico) per 6-20 minuti. Dopo la dissociazione, devono essere risciacquati con acqua prima della colorazione.
(4) Colorazione. Esistono molti tipi di coloranti. I cromosomi sono comunemente colorati con una soluzione colorante magenta con acido acetico.
(5) Premere la compressa. Posiziona il materiale su un vetrino, aggiungi una goccia d'acqua o una soluzione colorante, copri il vetrino con una copertura e premilo delicatamente con il pollice.
(6) Osserva. Dopo la compressione può essere osservato al microscopio.
