I principali componenti e funzioni del microscopio confocale laser
1. Foro stenopeico di illuminazione
Funzione: far passare la luce laser attraverso il foro stenopeico di illuminazione per formare una sorgente luminosa puntiforme. La sorgente luminosa puntiforme presenta vantaggi unici come la forte direzione della sorgente luminosa, la piccola divergenza, l'elevata luminosità, l'elevata coerenza spaziale e temporale e l'eccitazione della polarizzazione piana. E forma un dispositivo confocale con il foro stenopeico del rilevatore e il piano focale.
2. Divisore del raggio
Funzione: separare la fluorescenza eccitata dal campione da altre luci non di segnale.
3. Lente dell'obiettivo
4. Piano focale
Funzione: la sorgente luminosa del punto laser irradia l'oggetto e si concentra sul piano focale ed eccita il campione marcato in modo fluorescente affinché emetta fluorescenza per formare una macchia focale. Il punto luminoso viene elaborato da una serie di dispositivi come la lente dell'obiettivo e il divisore di raggio, ed è focalizzato rispettivamente sul foro stenopeico di illuminazione e sul foro stenopeico del rilevatore. Da qui deriva il significato di confocale.
5. Foro stenopeico del rilevatore
Funzione: svolge il ruolo di filtro spaziale. La luce diffusa sul piano non a fuoco e la luce diffusa all'esterno del punto non a fuoco sul piano di messa a fuoco vengono ostacolate al massimo, in modo da garantire che tutti i segnali di fluorescenza ricevuti dal foro stenopeico del rilevatore provengano dalla posizione di fuoco di lo spot del campione, quindi la diffrazione e la raccolta di punti luminosi sul campione e il rilevamento Lo spot stenopeico del rilevatore contiene le stesse informazioni (coniugato a due punti).
6. Tubo fotomoltiplicatore (rivelatore)
Funzione: accetta il segnale luminoso che passa attraverso il foro stenopeico, convertilo in un segnale elettrico e trasmettilo al computer e sullo schermo apparirà un'immagine chiara dell'intero piano focale.
7. Laser: lo sviluppo della tecnologia della microscopia confocale è inseparabile dal rapido sviluppo dei laser. Possiamo scegliere diversi laser in base alle esigenze di ricerca. Come ArUV (351,364 nm), HeCd (442 nm), AR (457,488,514 nm), ArKr (488,568,647 nm) Kr (568 nm), HeNe (543 nm), HeNe (633 nm) e così via.
8. Canale multifluorescenza: dispone di più canali di fluorescenza per realizzare più etichettature di campioni contemporaneamente.
