Struttura e componenti principali di un microscopio a fluorescenza
(1) Sorgente luminosa
Al giorno d'oggi, come sorgente luminosa viene comunemente utilizzata una lampada al mercurio a pressione ultra-da 200 W. È realizzato in vetro di quarzo e ha una forma sferica al centro, riempita con una certa quantità di mercurio. Durante il funzionamento, la scarica tra due elettrodi provoca l'evaporazione del mercurio e la pressione all'interno del bulbo aumenta rapidamente. Quando il mercurio evapora completamente, può raggiungere 50-70 pressioni atmosferiche standard, il che richiede generalmente 5-15 minuti. La luminescenza delle lampade al mercurio ad altissima pressione è il risultato della scarica tra gli elettrodi, che dissocia e riduce continuamente le molecole di mercurio, emettendo fotoni luminosi. Emette una forte luce ultravioletta e blu-viola, sufficiente ad eccitare varie sostanze fluorescenti, pertanto è ampiamente utilizzato nei microscopi a fluorescenza.
(2) Sistema di filtri colorati
Il sistema di filtri colorati è una parte importante di un microscopio a fluorescenza, costituito da una piastra del filtro di eccitazione e da una piastra del filtro di soppressione. Il modello della piastra del filtro e i nomi dei produttori sono spesso incoerenti. Le piastre filtranti prendono generalmente il nome dalle tonalità di colore di base, con le lettere davanti che rappresentano le tonalità di colore, le lettere dietro che rappresentano il vetro e i numeri che rappresentano le caratteristiche del modello. Microscopio Olimpo
(3) Lente dell'obiettivo
È possibile utilizzare tutti i tipi di obiettivi, ma le lenti acromatiche sono adatte per la fluorescenza grazie alla loro autofluorescenza estremamente bassa e alle prestazioni di trasmissione della luce (gamma di lunghezze d'onda). Dato che la luminosità della fluorescenza di un'immagine nel campo del microscopio è direttamente proporzionale al quadrato del rapporto di apertura della lente dell'obiettivo e inversamente proporzionale al suo ingrandimento, per migliorare la luminosità delle immagini in fluorescenza, è necessario utilizzare una lente dell'obiettivo con un rapporto di apertura maggiore. Soprattutto ad alto ingrandimento, il suo impatto è molto significativo. Pertanto, per campioni con fluorescenza insufficiente, si dovrebbe utilizzare una lente obiettivo con un rapporto di apertura elevato, combinata con una lente oculare il più bassa possibile (4 ×, 5 ×, 6,3 ×, ecc.).
(4) Specchio riflettente
Lo strato riflettente di uno specchio è solitamente rivestito di alluminio perché l'alluminio assorbe meno luce ultravioletta e visibile nella regione blu viola, con un tasso di riflessione superiore al 90%, mentre l'argento riflette solo il 70%; Generalmente vengono utilizzati specchi piani.
