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Somiglianze e differenze tra microscopio a contrasto di fase, microscopio invertito e microscopio a luce ordinaria

Jul 25, 2023

Somiglianze e differenze tra microscopio a contrasto di fase, microscopio invertito e microscopio a luce ordinaria

 

Questi tipi di microscopi sono tutti microscopi ottici, che utilizzano la luce visibile come metodo di rilevamento, che è diverso dai microscopi elettronici, dai microscopi a scansione a effetto tunnel e dai microscopi a forza atomica.
Nello specifico:


Microscopio a contrasto di fase, noto anche come microscopio a contrasto di fase. Perché la luce produrrà una leggera differenza di fase quando passa attraverso un campione trasparente e questa differenza di fase può essere convertita in un cambiamento di ampiezza o contrasto nell'immagine, in modo che la differenza di fase possa essere utilizzata per l'imaging. Fu inventato da Fritz Zernike negli anni '30 mentre studiava i reticoli di diffrazione. Per questo gli fu assegnato il Premio Nobel per la fisica nel 1953. Attualmente è ampiamente utilizzato per fornire immagini di contrasto per campioni trasparenti come cellule viventi e tessuti di piccoli organi.


Microscopia confocale: è un metodo di imaging ottico che utilizza l'illuminazione punto per punto e la modulazione spaziale del foro stenopeico per rimuovere la luce diffusa dal piano non focale del campione. Rispetto ai metodi di imaging tradizionali, può migliorare la risoluzione ottica e il contrasto visivo. La luce della sonda emessa da una sorgente luminosa puntiforme viene focalizzata sull'oggetto osservato attraverso la lente. Se l'oggetto è appena a fuoco, la luce riflessa dovrebbe convergere verso la sorgente luminosa attraverso la lente originale. Questo è il cosiddetto confocale, o confocale in breve. Uno specchio dicroico viene aggiunto al percorso ottico della luce riflessa nel microscopio confocale per piegare la luce riflessa che è passata attraverso l'obiettivo in altre direzioni. C'è un foro stenopeico (Pinhole) nel suo fuoco e il foro stenopeico si trova nel fuoco. Dietro il deflettore c'è un tubo fotomoltiplicatore (PMT). Si può immaginare che la luce riflessa prima e dopo il fuoco della luce di rilevamento passi attraverso questo insieme di sistema confocale, ma non può essere focalizzata sul piccolo foro e verrà bloccata dal deflettore. Il fotometro misura quindi l'intensità della luce riflessa nel punto focale. Il suo significato è: un oggetto traslucido può essere scansionato in tre dimensioni spostando il sistema di lenti. Un simile concetto fu proposto dallo studioso americano Marvin Minsky nel 1953. Dopo 30 anni di sviluppo, il laser fu utilizzato come sorgente luminosa per sviluppare un microscopio confocale che soddisfacesse l'ideale di Marvin Minsky.


Microscopio invertito: La composizione è la stessa di un normale microscopio, tranne che la lente dell'obiettivo e il sistema di illuminazione sono invertiti, la prima è sotto il tavolino e il secondo è sopra il tavolino. Comodo funzionamento e installazione di altre apparecchiature di acquisizione di immagini correlate.


Un microscopio ottico è un microscopio che utilizza una lente ottica per produrre un effetto di ingrandimento dell'immagine. La luce incidente su un oggetto viene amplificata da almeno due sistemi ottici (obiettivo e oculare). Innanzitutto, la lente dell'obiettivo produce un'immagine reale ingrandita e l'occhio umano osserva l'immagine reale ingrandita attraverso l'oculare, che funge da lente d'ingrandimento. Un microscopio ottico generale ha più lenti dell'obiettivo sostituibili in modo che l'osservatore possa modificare l'ingrandimento secondo necessità. Queste lenti dell'obiettivo sono generalmente posizionate su un disco della lente dell'obiettivo girevole, e i diversi oculari possono essere comodamente inseriti nel percorso ottico ruotando il disco della lente dell'obiettivo. I fisici scoprirono la legge tra ingrandimento e risoluzione e la gente capì che la risoluzione dei microscopi ottici ha un limite. Questo limite di risoluzione limita l'aumento infinito dell'ingrandimento. 1600 volte è diventato il limite massimo di ingrandimento dei microscopi ottici, che limita notevolmente l'applicazione della morfologia in molti campi.
La risoluzione dei microscopi ottici è limitata dalla lunghezza d'onda della luce, generalmente non superiore a 0,3 micron. La risoluzione può essere migliorata anche se il microscopio utilizza la luce ultravioletta come sorgente luminosa o se l'oggetto viene immerso nell'olio. Questa piattaforma è diventata la base per la costruzione di altri sistemi di microscopia ottica.

 

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