Somiglianze e differenze tra microscopi a fluorescenza e ottici
Il microscopio a fluorescenza è un tipo di microscopio ottico.
Un microscopio a fluorescenza utilizza la luce ultravioletta come sorgente luminosa per irradiare l'oggetto da esaminare, facendolo emettere fluorescenza, quindi la forma e la posizione dell'oggetto vengono osservate al microscopio. La microscopia a fluorescenza viene utilizzata per studiare l'assorbimento e il trasporto di sostanze, la distribuzione e la localizzazione delle sostanze chimiche nelle cellule.
Alcune sostanze nelle cellule, come la clorofilla, possono emettere fluorescenza dopo l'irradiazione con luce ultravioletta; alcune altre sostanze non possono fluorescere da sole, ma se colorate con coloranti fluorescenti o anticorpi fluorescenti, possono anche fluorescere dopo l'irradiazione con luce ultravioletta e il microscopio a fluorescenza è uno degli strumenti per effettuare ricerche qualitative e quantitative su tali sostanze.
Il microscopio a fluorescenza e il microscopio ordinario presentano le seguenti differenze:
1. Il metodo di illuminazione è solitamente del tipo a goccia, ovvero la sorgente luminosa viene proiettata sul campione attraverso la lente dell'obiettivo;
2. La sorgente luminosa è la luce ultravioletta, che ha una lunghezza d'onda più corta e un potere risolutivo maggiore rispetto ai normali microscopi;
3. Sono presenti due filtri speciali, quello davanti alla sorgente luminosa viene utilizzato per filtrare la luce visibile e quello tra l'oculare e la lente dell'obiettivo viene utilizzato per filtrare la luce ultravioletta per proteggere l'occhio umano.
Il microscopio a fluorescenza è anche un tipo di microscopio ottico, la differenza principale è che la lunghezza d'onda di eccitazione dei due è diversa. Ciò determina la struttura del microscopio a fluorescenza e del microscopio ottico ordinario e l'uso di metodi diversi.
Il microscopio a fluorescenza è lo strumento di base per la citochimica dell'immunofluorescenza. È composto da sorgente luminosa, sistema di piastre filtranti, sistema ottico e altri componenti principali. Utilizza una determinata lunghezza d'onda della luce per stimolare il campione a emettere fluorescenza, che viene ingrandita attraverso la lente dell'obiettivo e il sistema oculare per osservare l'immagine fluorescente del campione.
