Sette modalità di osservazione del microscopio
La microscopia in campo chiaro è un metodo di esame microscopico familiare, ampiamente utilizzato in patologia, ispezione e osservazione di sezioni colorate. Tutti i microscopi possono svolgere questa funzione.
2. Campo scuro DF
Il campo oscuro è in realtà l'illuminazione del campo oscuro. Le sue caratteristiche sono diverse da quelle del campo chiaro. Non osserva direttamente la luce dell'illuminazione, ma osserva la luce riflessa o diffratta dall'oggetto in esame. Pertanto, il campo visivo diventa uno sfondo scuro, mentre l'oggetto in ispezione presenta un'immagine luminosa.
Il principio del campo oscuro si basa sul fenomeno di Tyndall in ottica. Quando la polvere viene attraversata direttamente da una luce forte, l'occhio umano non può osservarla, a causa della diffrazione della luce forte. Se la luce viene proiettata obliquamente su di esso, a causa del riflesso della luce, la particella sembra aumentare di dimensioni ed è visibile all'occhio umano.
Un accessorio speciale richiesto per l'osservazione in campo oscuro è un condensatore di campo oscuro. La sua caratteristica è quella di non permettere al raggio luminoso di attraversare l'oggetto dal basso verso l'alto, ma di modificare il percorso della luce in modo che questa venga sparata obliquamente verso l'oggetto, in modo che la luce illuminante non entri direttamente nella lente dell'obiettivo, e utilizza la luce di riflessione o diffrazione formata dalla superficie dell'oggetto Immagine luminosa. La risoluzione dell'osservazione in campo oscuro è molto più alta di quella dell'osservazione in campo chiaro, fino a {{0}}.02—0.004
3.Contrasto di fase PH
Durante lo sviluppo dei microscopi ottici, l'invenzione di successo della microscopia a contrasto di fase è un risultato importante nella moderna tecnologia di microscopia. Sappiamo che l'occhio umano può distinguere solo la lunghezza d'onda (colore) e l'ampiezza (luminosità) delle onde luminose. Per campioni biologici incolori e trasparenti, quando la luce passa attraverso, la lunghezza d'onda e l'ampiezza cambiano poco ed è difficile osservare il campione nell'osservazione in campo chiaro. .
Il microscopio a contrasto di fase utilizza la differenza del percorso ottico dell'oggetto da ispezionare, ovvero utilizza efficacemente il fenomeno di interferenza della luce per modificare la differenza di fase che non può essere risolta dall'occhio umano in una differenza di ampiezza risolvibile, anche per incolore e trasparente sostanze. diventare chiaramente visibile. Ciò facilita notevolmente l'osservazione delle cellule viventi, quindi la microscopia a contrasto di fase è ampiamente utilizzata nei microscopi invertiti.
Il principio di base del microscopio a contrasto di fase è quello di modificare la differenza del percorso ottico della luce visibile che passa attraverso il campione in una differenza di ampiezza, migliorando così il contrasto tra le varie strutture e rendendo le varie strutture chiaramente visibili. La luce viene rifratta dopo essere passata attraverso il campione, devia dal percorso ottico originale ed è ritardata di 1/4λ (lunghezza d'onda) allo stesso tempo. Se viene aumentato o diminuito di 1/4λ, la differenza del percorso ottico diventa 1/2λ e i due raggi interferiscono dopo l'asse ottico Rafforzare, aumentare o diminuire l'ampiezza, migliorare il contrasto. In termini di struttura, i microscopi a contrasto di fase hanno due caratteristiche speciali diverse dai normali microscopi ottici:
1. Il diaframma anulare si trova tra la sorgente luminosa e il condensatore e la sua funzione è quella di fare in modo che la luce che passa attraverso il condensatore formi un cono di luce cavo e la focalizzi sul campione.
2. Piatto di fase anulare Un piatto di fase rivestito con fluoruro di magnesio viene aggiunto alla lente dell'obiettivo, che può ritardare la fase della luce diretta o della luce diffratta di 1/4λ. Diviso in due tipi:
Una piastra di fase: ritarda la luce diretta di 1/4λ, aggiungi le onde luminose dopo che i due gruppi di onde luminose si combinano e aumenta l'ampiezza, la struttura del campione è più luminosa del mezzo circostante, formando un contrasto luminoso (o contrasto negativo) .
Piastra di fase B: ritarda la luce diffratta di 1/4λ, le onde luminose dei due gruppi di luce vengono sottratte dopo che l'asse è stato allineato e l'ampiezza diventa più piccola, formando un contrasto scuro (o contrasto positivo) e la struttura è più scuro del mezzo circostante
Quattro. Contrasto interferenziale differenziale DIC
La microscopia a interferenza differenziale è apparsa negli anni '60. Non solo può osservare oggetti incolori e trasparenti, ma mostra anche un senso di rilievo tridimensionale e presenta alcuni vantaggi che la microscopia a contrasto di fase non può ottenere. L'effetto di osservazione è ancora migliore. realistico.
principio;
L'interferenza differenziale chiamata microscopia è l'uso di uno speciale prisma Wollaston per dividere il raggio di luce. Le direzioni di vibrazione dei raggi divisi sono perpendicolari l'una all'altra e l'intensità è uguale, e i raggi passano attraverso l'oggetto in due punti molto vicini tra loro, e c'è una leggera differenza di fase. Poiché la distanza di divisione tra i due raggi di luce è estremamente ridotta, non vi è alcun fenomeno di doppia immagine, quindi l'immagine presenta una sensazione tridimensionale tridimensionale.
