Uso corretto del microscopio a fluorescenza invertita
Il microscopio a fluorescenza invertito è un microscopio multifunzionale utilizzato nel campo della ricerca scientifica biologica di fascia alta. La sua struttura è complessa e costosa. Pertanto, affinché gli studenti laureati in medicina possano comprendere correttamente il funzionamento e l'uso del microscopio a fluorescenza invertita, gli insegnanti devono prima dimostrare l'effettivo funzionamento del microscopio a fluorescenza invertita. In precedenza, era stato istituito un corso per apprendere le conoscenze di base dei microscopi a fluorescenza invertita, introducendo la struttura, il principio, la funzione e i metodi di utilizzo di base dei microscopi a fluorescenza invertita, e quindi nell'operazione specifica, per diversi campioni, dimostrare diverse funzioni, da superficiale in profondità, gradualmente Standardizzare l'uso di microscopi a fluorescenza invertita da parte di studenti laureati in medicina.
1. Uso corretto dell'osservazione in campo chiaro. Una delle funzioni del microscopio a fluorescenza invertita è l'osservazione in campo chiaro. Il principio di base è che dopo che il campione è stato irradiato dalla luce, l'assorbimento della luce di ciascuna parte è diverso per realizzare l'imaging su uno sfondo luminoso. È adatto principalmente per cellule colorate o colorate, Osservazione di campioni come sezioni di tessuto.
2. Uso corretto dell'osservazione in contrasto di fase. La seconda funzione del microscopio a fluorescenza invertita è l'osservazione in contrasto di fase. Il suo principio di base è convertire la differenza del percorso ottico di diverse parti del campione in differenza di ampiezza. L'osservazione è realizzata attraverso una lente dell'obiettivo a contrasto di fase con un piatto di fase e una lente del condensatore con un diaframma ad anello. È principalmente applicabile a Per l'osservazione di cellule viventi o sezioni di tessuto non colorate, nel processo di insegnamento sperimentale, oltre a guidare correttamente gli studenti laureati in medicina ad osservare i metodi operativi di base dell'osservazione del contrasto di fase, è più importante guidarli a comprendere e padroneggiare i campioni utilizzati per l'osservazione in contrasto di fase. Per loro, l'osservazione microscopica delle cellule in coltura è la più comunemente utilizzata nella futura ricerca scientifica. Innanzitutto, per la selezione dell'attrezzatura cellulare, si consiglia generalmente di utilizzare piatti di coltura in vetro e plastica, piastre di coltura e flaconi di coltura. La maggior parte di essi è incolore e trasparente e può essere osservata direttamente su un microscopio a fluorescenza invertito senza far fuoriuscire il fluido cellulare e altri trattamenti. In secondo luogo, durante l'osservazione microscopica, non aprire a piacimento il coperchio dell'apparecchiatura, in modo da non contaminare le cellule. Infine, per gli operatori, è necessario indossare guanti, mascherine e camici bianchi, che possono non solo proteggere la propria salute ma anche prevenire la contaminazione cellulare.
3. Uso corretto dell'osservazione della fluorescenza. La terza funzione del microscopio a fluorescenza invertita è l'osservazione della fluorescenza. Il principio di base è utilizzare la luce di eccitazione per eccitare il campione per generare fluorescenza, in modo da realizzare l'osservazione della forma e della posizione del campione. È adatto principalmente per l'osservazione di campioni marcati con fluorescenza. L'osservazione della fluorescenza è una funzione importante di un microscopio a fluorescenza invertito e i suoi accessori sono costosi e speciali da usare. Affinché gli studenti laureati in medicina possano comprendere correttamente il funzionamento e l'uso dell'osservazione della fluorescenza, gli insegnanti non dovrebbero solo insegnare loro i metodi operativi di base, ma soprattutto insegnare loro a padroneggiarne le particolarità. Prima di tutto, nella preparazione dei campioni, il vetrino e il vetrino coprioggetto devono avere una superficie liscia e uno spessore adeguato (il vetrino deve essere compreso tra 0,8 mm e 1,2 mm e il vetrino coprioggetto deve essere di circa { {5}}.17mm); il campione deve avere uno spessore adeguato ed evitare la sovrapposizione delle cellule o il mascheramento da parte di impurità; il mezzo di montaggio deve utilizzare una miscela di volume uguale di glicerolo e tampone carbonato (0.5mol/L pH9.0-9.5). In secondo luogo, prima dell'osservazione fluorescente, la luce elettrica nella stanza e la luce bianca del microscopio fluorescente invertito devono essere spente per garantire l'ambiente in una stanza buia. Infine, nell'osservazione della fluorescenza, il tempo di osservazione dovrebbe essere strettamente controllato, generalmente 1-2 ore/ora è appropriato, altrimenti la fluorescenza si attenuerà e scomparirà; durante la regolazione della sorgente luminosa, indossare occhiali protettivi per evitare il danneggiamento dei raggi ultravioletti sugli occhiali.
4. Uso corretto dell'acquisizione di immagini. Nella ricerca scientifica, non solo è richiesto che il microscopio a fluorescenza invertito possa realizzare varie osservazioni, ma richiede anche che il microscopio a fluorescenza invertito possa realizzare l'acquisizione di immagini. Il sistema di microscopio a fluorescenza invertito combina un microscopio ottico con un computer attraverso la conversione fotoelettrica, non solo per l'osservazione microscopica sull'oculare, ma anche per l'osservazione, la modifica e il salvataggio di immagini dinamiche in tempo reale sul computer.
