Metodo di conteggio diretto al microscopio microbico
Fasi sperimentali (metodo di conteggio diretto al microscopio microbico)
1. Diluizione
Diluire opportunamente la sospensione di lievito di birra. Se la soluzione batterica non è concentrata non è necessario diluirla.
2. Esame microscopico e sala conta
Prima di aggiungere i campioni, eseguire un esame microscopico della camera di conteggio della scheda di conteggio. Se è presente dello sporco, è necessario pulirlo prima del conteggio.
3. Aggiungi campioni
Coprire la piastra per il conteggio delle cellule del sangue pulita e asciutta con un vetro di copertura, quindi utilizzare un contagocce sterile a bocca sottile per far cadere una piccola goccia (non troppa) della soluzione di lievito diluita dal bordo del vetro di copertura. Consentire alla soluzione batterica di entrare nella camera di conteggio lungo lo spazio mediante permeazione capillare. Generalmente la camera di conteggio può essere riempita con una soluzione batterica. Fare attenzione a non generare bolle.
4. Conteggio microscopico
Dopo aver riposato per 5 minuti, posizionare la scheda per il conteggio delle cellule del sangue sul tavolino del microscopio, utilizzare prima un microscopio a bassa potenza per individuare la posizione della sala di conteggio, quindi passare a un microscopio ad alta potenza per il conteggio. Se la soluzione batterica risulta essere troppo densa o troppo liquida prima del conteggio, la diluizione deve essere regolata nuovamente prima del conteggio. Il requisito generale di diluizione del campione prevede che siano presenti circa 5-10 corpi batterici per piccola cellula. Selezionare 5 celle da ciascuna stanza di conteggio (4 angoli e celle centrali opzionali) per il conteggio. Il micelio situato sulla linea della griglia generalmente conta solo sulle linee superiore e destra. Se il lievito germoglia e la dimensione della gemma raggiunge la metà della cellula madre, vengono effettuate due conte batteriche. Per contare un campione, il contenuto batterico del campione deve essere calcolato in base ai valori ottenuti da due camere di conteggio.
5. Pulire la scheda per il conteggio delle cellule del sangue
Dopo l'uso, sciacquare la scheda per il conteggio delle cellule del sangue con una colonna d'acqua sul rubinetto. Non utilizzare oggetti duri per lavarlo. Dopo il lavaggio, asciugalo all'aria da solo o asciugalo con un asciugacapelli. All'esame microscopico, osservare se in ogni piccola cellula sono presenti corpi batterici residui o altri precipitati. Se non è pulito, deve essere lavato ripetutamente fino a quando non sarà pulito.
