Metodi di preparazione dei campioni per la microscopia ottica ed elettronica di pellicole
Il metodo di microfilm comprende generalmente quattro categorie: metodo di sezionamento, metodo di sigillatura generale, metodo di rivestimento e metodo di pressatura.
①Metodo Slice. Lo spessore della fetta del microscopio ottico è compreso tra 2 e 25 micron, materiali generali vegetali e animali, la fetta è appropriata di circa 10 micron di spessore. Il metodo di sezionamento varia a seconda dei diversi agenti di inclusione. Comunemente utilizzati sono il metodo di sezionamento con paraffina, il metodo di sezionamento con colla di cotone, il metodo di sezionamento congelato e il metodo di glicole metacrilato (denominato metodo GMA). Il metodo di sezionamento in paraffina comprende le fasi di fissazione, inclusione, sezionamento, colorazione, disidratazione e sigillatura. La chiave è incorporare il biomateriale nella cera di paraffina e utilizzare la cera di paraffina come supporto per tagliare il biomateriale immerso nel blocco di cera in fette sottili ideali. Il processo operativo è il seguente: fissazione → lavaggio con acqua → passo dopo passo da bassa ad alta concentrazione disidratazione dell'alcool → trasparenza allo xilene → immersione in cera → inclusione → sezionamento → rappezzatura → deparaffinazione con xilene → passo dopo passo da alta a bassa concentrazione trattamento con alcol e infine passaggio all'acqua → colorazione → disidratazione graduale dell'alcol da bassa a alta concentrazione → trasparenza dello xilene → sigillatura con adesivo in resina. I passaggi fondamentali coinvolti sono gli stessi in tutti i tipi di tecniche di produzione cinematografica.
② Metodo di sigillatura integrale. Utilizzato per singole cellule, piccoli organismi o organi dispersi con il metodo su pellicola montata intera. Questo metodo richiede anche varie fasi di fissazione, colorazione, disidratazione, trasparenza e sigillatura. Questo metodo viene utilizzato per la preparazione dell'apparato boccale di merletti e insetti.
Metodo dello striscio. Metodo di preparazione in cui un campione biologico facilmente disperdibile viene rivestito su un vetrino. Lo striscio di sangue è un esempio.
④Metodo di pressatura. I tessuti naturali facilmente disperdibili o i tessuti facilmente disperdibili dopo il trattamento, come spermatociti animali, cellule dell'apice della radice, ecc. sul vetrino, più un vetrino coprioggetto, quindi schiacciano con forza i tessuti, in modo che le cellule o le strutture intracellulari si diffondano in uno strato dei metodi di ripresa. Il metodo della pressa viene spesso utilizzato per osservare i cromosomi, solitamente colorati con acetato di magenta, rosso lichene e rosso acido fenico.
