Principali componenti e funzioni del microscopio confocale laser
1. Foro stenopeico illuminante
Funzione: il laser passa attraverso il foro stenopeico di illuminazione per formare una sorgente luminosa puntiforme. La sorgente luminosa puntiforme presenta vantaggi unici come la forte direzionalità della sorgente luminosa, la piccola divergenza, l'elevata luminosità, l'elevata coerenza spaziale e temporale e l'eccitazione della polarizzazione piana. E forma un dispositivo confocale con il foro stenopeico del rilevatore e il piano focale.
2. Divisore del raggio
Funzione: separare la fluorescenza di eccitazione del campione da altre luci non di segnale.
3. Obiettivo
4. Piano focale
Funzione: la sorgente luminosa puntiforme laser illumina l'oggetto e lo focalizza sul piano focale, stimolando il campione etichettato in modo fluorescente a emettere fluorescenza per formare una macchia focale. Il punto luminoso viene elaborato da una serie di dispositivi come la lente dell'obiettivo e il divisore del raggio, ed è focalizzato rispettivamente sul foro stenopeico dell'illuminazione e sul foro stenopeico del rilevatore. Da qui deriva il significato di confocale.
5. Foro stenopeico del rilevatore
Funzione: Agisce come filtro spaziale. Massimizzare l'ostruzione della luce diffusa sul piano non focalizzato e della luce diffusa all'esterno del punto non focalizzato sul piano di messa a fuoco per garantire che tutti i segnali di fluorescenza ricevuti dal foro stenopeico del rilevatore provengano dalla posizione di messa a fuoco del punto campione, in modo che il punto focalizzato sulla diffrazione il campione e il rilevamento Lo spot stenopeico contiene le stesse informazioni (due punti coniugati).
6. Tubo fotomoltiplicatore (rivelatore)
Funzione: riceve il segnale luminoso che passa attraverso il foro stenopeico, lo converte in un segnale elettrico e lo trasmette al computer, in modo che sullo schermo appaia un'immagine chiara dell'intero piano focale.
7. Laser: lo sviluppo della tecnologia della microscopia confocale è inseparabile dal rapido sviluppo dei laser. Possiamo scegliere diversi laser in base alle esigenze di ricerca. Come ArUV (351,364 nm), HeCd (442 nm), AR (457, 488, 514 nm), ArKr (488, 568, 647 nm) Kr (568 nm), HeNe (543 nm), HeNe (633 nm), ecc.
8. Canali di fluorescenza multipli: dispone di canali di fluorescenza multipli per ottenere più etichettature di campioni contemporaneamente.
