Introduzione ai vantaggi e agli svantaggi della microscopia a scansione laser multi-fotone
1. Eccitato da luce rossa o a infrarossi, la dispersione della luce è piccola e la dispersione di piccole particelle è inversamente proporzionale alla quarta potenza della lunghezza d'onda.
2. Più fotoni sparsi dalla sezione di imaging possono essere raccolti senza la necessità di fori.
3. I fori non possono distinguere i fotoni sparsi emessi da aree sgocciolate o focali e i multifoton hanno un migliore rapporto segnale-rumore nell'imaging profondo.
4. La luce ultravioletta o visibile utilizzata per l'eccitazione a singolo fotone viene facilmente assorbita e attenuata dal campione prima che il raggio raggiunga il piano focale, rendendo difficile eccitare gli strati profondi.
5. In termini di osservazione della microscopia biologica, la prima considerazione è quella di non danneggiare lo stato attivo dell'organismo stesso, mantenere la circolazione di acqua, concentrazione di ioni, ossigeno e sostanze nutritive. Nel campo dell'osservazione della luce, sia l'energia termica che quella dei fotoni devono rimanere all'interno della dose di irradiazione e dell'energia della luce che non danneggiano le cellule.
6. La microscopia multifotonica presenta molti vantaggi. In termini di risoluzione tridimensionale, invasione della profondità, efficienza di scattering, luce di fondo, rapporto segnale-rumore, controllo, ecc., Ci sono caratteristiche che i microscopi laser precedenti non possiedono o non possono superare
Svantaggi del microscopio a scansione laser multiphoton:
1. Solo per l'imaging a fluorescenza.
2. Se il campione include cromofori che possono assorbire la luce di eccitazione, il campione può essere sottoposto a danni termici.
3. La risoluzione è leggermente ridotta, sebbene possa essere migliorata utilizzando contemporaneamente piccoli fori confocali, c'è perdita del segnale.
4. A causa dei limiti di costosi laser ultravefast, il costo dei microscopi a scansione multiphoton è relativamente elevato.
