Introduzione alla microscopia a contrasto di fase
Un microscopio a contrasto di fase è un microscopio che converte la differenza di fase (o differenza di campo ottico) prodotta quando la luce passa attraverso un oggetto in una variazione di ampiezza (intensità della luce). Viene utilizzato principalmente per osservare cellule vive, sezioni di tessuto non colorate o campioni colorati privi di contrasto.
L'occhio umano può identificare solo i cambiamenti nella lunghezza d'onda (colore) e nell'ampiezza della luce visibile, ma non i cambiamenti di fase. La maggior parte dei campioni biologici sono altamente trasparenti e l'ampiezza dell'onda luminosa rimane sostanzialmente invariata dopo il suo passaggio ed esiste solo il cambiamento di fase.
La microscopia a contrasto di fase trasforma fondamentalmente la differenza del campo ottico della luce visibile attraverso il campione nella differenza di ampiezza, che migliora il contrasto tra le varie strutture e rende le varie strutture chiaramente visibili. La luce attraverso il campione dopo la rifrazione, deviata dal percorso ottico originale, pur essendo ritardata di 1/4 λ (lunghezza d'onda), se poi aumenta o diminuisce di 1/4 λ, la differenza del campo ottico diventa 1/2 λ, i due raggi di asse della fotosintesi dopo l'interferenza per rafforzare l'ampiezza aumenta o diminuisce per migliorare il contrasto.
Dal punto di vista strutturale, il microscopio a contrasto di fase si differenzia dal normale microscopio ottico:
1. diaframma a forma di anello con un'apertura a forma di anello del diaframma, installato tra la sorgente luminosa e il concentratore, il ruolo è quello di far passare la luce attraverso il concentratore per formare un cono di luce cavo, concentrandosi sul campione.
2. microscopio a contrasto di fase della piastra di fase nella lente dell'obiettivo all'interno dell'aumento della piastra di fase rivestita con fluoruro di magnesio, il ruolo del ritardo di fase della luce diretta o diffratta 1/4 λ. La piastra di fase ha due aree, luce diretta attraverso la parte chiamata "superficie coniugata", luce diffratta attraverso la parte chiamata "superficie di compensazione". Superficie di compensazione". La piastra di fase è divisa in due tipologie in base al suo effetto di lavoro:
(1) Piastra di fase A +: luce diretta ritardata di 1/4 λ, due gruppi di onde luminose sovrapposizione coassiale di onde luminose, aumento di ampiezza, la struttura del campione è più luminosa del mezzo circostante, la formazione di contrasto luminoso (o contrasto negativo ).
(2) Piastra di fase B +: luce diffratta ritardata di 1/4 λ, due gruppi di onde luminose dopo la fusione dell'asse della riduzione di fase dell'onda luminosa, l'ampiezza diventa più piccola, la struttura del campione è più scura del mezzo circostante, il formazione di contrasto scuro (o contrasto positivo). L'obiettivo con una piastra di fase è chiamato obiettivo a contrasto di fase, spesso nell'alloggiamento dell'obiettivo con la parola "Ph".
