Come scegliere un microscopio a fluorescenza adatto
Il microscopio a fluorescenza è un'attrezzatura di imaging microscopico standard nei laboratori e nei dipartimenti di patologia, che utilizza caratteristiche di fluorescenza per l'osservazione e l'imaging. È ampiamente utilizzato in vari campi come biologia cellulare, neurobiologia, botanica, microbiologia, patologia, genetica, ecc. L'imaging a fluorescenza ha i vantaggi di elevata sensibilità e specificità, rendendolo molto adatto per l'osservazione della distribuzione di proteine specifiche, organelli, ecc. Nei tessuti e nelle cellule, studiando la localizzazione e l'interazione, per il tracking della dinamica come i cambiamenti di concentrazione e la concentrazione di concentrazione e così tanto.
Selezione di fonte di luce fluorescente
Le sorgenti luminose fluorescenti comunemente usate attualmente includono lampade a mercurio, lampade a alogenuri di metallo e fonti di luce a LED in rapido sviluppo negli ultimi anni. Lo spettro delle fonti di luce fluorescente può essere continuo o discontinuo e l'energia varia in bande diverse. Le fonti di luce a LED stanno diventando gradualmente la principale fonte di luce per i microscopi a fluorescenza a causa delle loro bande spettrali relativamente strette, una produzione di energia più stabile, una durata più lunga e una maggiore sicurezza e una cordialità ambientale.
Microscopio confocale
Nella tradizionale osservazione della microscopia a fluorescenza, a causa della sovrapposizione di sostanze di etichettatura fluorescente e strutture di fluorescenza spontanea, sono strettamente legate insieme. Tuttavia, gli obiettivi di microscopia tradizionale epifluorescenza non solo raccolgono luce dal piano focale, ma raccolgono anche luce sparsa sopra e sotto il piano focale, con conseguente risoluzione e contrasto di immagini notevolmente ridotte.
L'imaging confocale rileva solo la porzione di luce riflessa dal piano focale, risolvendo così il problema di cui sopra. La sorgente luminosa forma un punto piccolo e bello sul piano focale attraverso un foro stenopeico e la luce emessa dal piano focale viene raccolta dalla lente oggettiva. La maggior parte della fluorescenza emessa da punti sopra o sotto il piano focale dell'obiettivo non può convergere nel foro stenopeico. Solo la fluorescenza situata sul piano focale e una piccola porzione di fluorescenza sgridata possono passare attraverso il foro stenopeico, mentre la trave di luce all'esterno del piano focale converge davanti o dietro la piastra del foro e viene bloccata dall'ingresso nel rivelatore attraverso il foro stenta. L'immagine rilevata è l'immagine dal piano focale, quindi la qualità dell'immagine finale è notevolmente migliorata.
A causa dei vari vantaggi e praticità della microscopia confocale a scansione laser, la microscopia confocale è attualmente un assistente sperimentale indispensabile nei campi ad alta precisione di biologia cellulare, botanica e ricerca cellulare. Allo stesso tempo, nei futuri centri di ricerca scientifica, sarà lo strumento di ricerca fondamentale e fondamentale.
