I microscopi a fluorescenza sono divisi in due tipi in base ai loro percorsi di luce:
1. Microscopio a fluorescenza di trasmissione: la sorgente di luce di eccitazione viene utilizzata per eccitare la fluorescenza passando attraverso il materiale del campione attraverso una lente del condensatore. Possono anche essere usati concentratori di campo scuro comunemente usati e i concentratori ordinari possono essere utilizzati per regolare il riflettore per reindirizzare e mettere in sella la luce di eccitazione sul campione. Questo è un microscopio a fluorescenza relativamente vecchio stile. Il suo vantaggio è una forte fluorescenza a basso ingrandimento, ma il suo svantaggio è che la sua fluorescenza diminuisce con l'aumentare dell'ingrandimento. Pertanto, è meglio osservare materiali per campioni più grandi.
2. Il microscopio a fluorescenza in calo della luce è un nuovo tipo di microscopio a fluorescenza sviluppato nei tempi moderni. A differenza di quanto sopra, la luce di eccitazione cade dalla lente oggettiva verso il basso sulla superficie del campione, usando lo stesso obiettivo il condensatore di illuminazione e l'obiettivo per la raccolta di fluorescenza. Uno splitter a raggio a doppio colore deve essere aggiunto al percorso ottico, che si trova a 45 gradi dalla luce dell'uranio. Angolo, la luce di eccitazione si riflette nella lente oggettiva e focalizzata sul campione. La fluorescenza generata dal campione, nonché la luce di eccitazione riflessa dalla superficie della lente oggettiva e del vetro di copertura, immette la lente oggettiva e ritorna allo splitter a raggio a doppio colore, separando la luce di eccitazione e la fluorescenza. La luce di eccitazione residua viene quindi assorbita dal filtro bloccante. Se vengono utilizzate diverse combinazioni di filtri di eccitazione/separatori a raggio a doppio colore/filtri bloccanti, possono soddisfare le esigenze di diversi prodotti di reazione fluorescente. I vantaggi di questo microscopio a fluorescenza sono l'illuminazione uniforme sul campo, l'imaging chiaro e la fluorescenza più forte con ingrandimento maggiore.
Istruzioni per l'utilizzo del microscopio a fluorescenza.
1. Accendi la fonte di luce, la lampada al mercurio ultra-ad alta pressione deve essere preriscaldata per alcuni minuti per raggiungere il punto luminoso.
2. La microscopia a fluorescenza di trasmissione richiede l'installazione del filtro di eccitazione richiesto tra la sorgente della lampada e il condensatore e il corrispondente filtro di blocco dietro l'obiettivo oggettivo. Il microscopio a fluorescenza in calo della luce deve inserire il filtro di eccitazione richiesto/splitter a raggio a doppio colore/blocco filtro bloccante nella fessura del percorso ottico.
3. Osservare con un microscopio a bassa potenza e regolare il centro della sorgente luminosa in base al dispositivo di regolazione di diversi tipi di microscopi di fluorescenza, in modo che si trovi al centro dell'intero punto di illuminazione.
4. Posizionare il campione e concentrarlo per l'osservazione. È necessario prestare attenzione durante l'uso: non osservare direttamente con gli occhi prima di installare il filtro per evitare danni agli occhi; Quando si osservano i campioni con un microscopio all'olio, è necessario utilizzare uno speciale microscopio all'olio non fluorescente; Dopo che la lampada al mercurio ad alta pressione è stata spenta, non può essere immediatamente accesi. Per riavviare 5 minuti, altrimenti sarà instabile e influenzerà la durata della vita della lampada da mercurio.
