(Differenze tra microscopi a fluorescenza (a due fotoni, confocale) e microscopi ordinari
Il microscopio a fluorescenza è l'uso della luce ultravioletta come sorgente luminosa, utilizzata per irradiare l'oggetto da esaminare, in modo che l'oggetto emetta una sorgente luminosa, quindi l'osservazione dell'oggetto viene effettuata al microscopio. Viene utilizzato principalmente per le cellule di immunofluorescenza, composte principalmente da sorgente luminosa, sistema di piastre filtranti e sistema ottico per osservare l'immagine fluorescente dei campioni attraverso l'ingrandimento dell'oculare e della lente dell'obiettivo. Diamo un'occhiata al microscopio a fluorescenza e al microscopio ottico ordinario che tipo di differenza presenta.
1, nella modalità illuminazione
L'illuminazione del microscopio a fluorescenza è generalmente di tipo cadente, vale a dire la sorgente luminosa avviene attraverso la lente dell'obiettivo per applicare il campione da testare.
2, nella delibera
Il microscopio a fluorescenza utilizza la luce ultravioletta come sorgente luminosa, la lunghezza d'onda è relativamente corta, ma la risoluzione è superiore rispetto al normale microscopio ottico.
3, la differenza nel filtro
Il microscopio a fluorescenza prevede l'uso di due filtri speciali, davanti alla sorgente luminosa viene utilizzato per filtrare la luce visibile, tra la lente dell'obiettivo e l'oculare per filtrare la luce ultravioletta, che può proteggere l'occhio umano.
Anche il microscopio a fluorescenza appartiene a un tipo di microscopio ottico, principalmente la lunghezza d'onda di eccitazione del microscopio a fluorescenza è breve, quindi questo ha portato alla costruzione di strutture varie del microscopio a fluorescenza e del microscopio ordinario e all'uso di diversi, i microscopi a fluorescenza la maggior parte hanno una buona cattura della funzione di luce debole, quindi in la fluorescenza estremamente debole, la sua capacità di imaging è buona. Grazie al continuo miglioramento del microscopio a fluorescenza negli ultimi anni, anche il rumore è stato notevolmente ridotto. Pertanto, sono stati applicati sempre più microscopi a fluorescenza.
Il microscopio a fluorescenza a due fotoni presenta molti vantaggi:
(1) Le lunghezze d'onda della luce più lunghe sono meno influenzate dalla diffusione rispetto alle lunghezze d'onda della luce più corte che penetrano facilmente nel campione;
(2) Le molecole fluorescenti all'esterno del piano focale non vengono eccitate in modo che più luce di eccitazione possa raggiungere il piano focale, in modo che la luce di eccitazione possa penetrare più in profondità nel campione;
3) Le lunghezze d'onda più lunghe della luce del vicino infrarosso sono meno tossiche per le cellule rispetto alle lunghezze d'onda più corte;
4) Quando si utilizza un microscopio a due fotoni per osservare un campione, il fotosbiancamento e la fototossicità sono presenti solo sul piano focale. Pertanto, i microscopi a due fotoni sono più adatti dei microscopi a fotone singolo per l'osservazione di campioni spessi, per l'osservazione di cellule viventi o per condurre esperimenti di fotosbiancamento spot.
