Differenza tra microscopia a due fotoni e microscopia confocale laser
Il microscopio confocale laser è un insieme di sistemi di osservazione, analisi e output che utilizzano il laser come sorgente luminosa, principio di messa a fuoco coniugato e dispositivo sulla base del microscopio ottico tradizionale ed elaborazione digitale delle immagini dell'oggetto osservato utilizzando il computer. Il sistema principale comprende una sorgente di luce laser, un microscopio automatico, un modulo di scansione (compreso il canale ottico confocale e il foro stenopeico, uno specchio di scansione, un rilevatore), un processore di segnale digitale, un computer e apparecchiature di output delle immagini (monitor, stampante a colori) e così via. Con il microscopio confocale a scansione laser, il campione osservato può essere tomografato e ripreso. Di conseguenza, la struttura spaziale tridimensionale delle cellule può essere osservata e analizzata senza danni.
Allo stesso tempo, la microscopia confocale a scansione laser è un potente strumento per l'osservazione dinamica di cellule viventi, l'etichettatura multipla con immunofluorescenza e l'etichettatura con fluorescenza ionica. La natura dello spettro viene analizzata con precisione e vengono distinti i segnali di diversi marcatori con spettri di emissione altamente sovrapposti.
Ancora più importante, per la colorazione fluorescente multicolore, elimina completamente l'effetto della diafonia della fluorescenza riducendo al minimo la perdita del segnale di fluorescenza dal campione. Tutti questi sono fuori dalla portata dei microscopi ottici generali.
