Differenza tra microscopio ottico ordinario e microscopio a fluorescenza
Microscopio ottico: è uno strumento ottico che utilizza principi ottici per ingrandire e visualizzare piccoli oggetti che non possono essere distinti dall'occhio umano, in modo che le persone possano estrarre informazioni strutturali dettagliate.
Microscopio a fluorescenza: un microscopio a fluorescenza utilizza la luce ultravioletta come sorgente luminosa per illuminare l'oggetto da ispezionare per farlo emettere fluorescenza, quindi osservare la forma e la posizione dell'oggetto al microscopio. La microscopia a fluorescenza viene utilizzata per studiare l'assorbimento e il trasporto di sostanze all'interno delle cellule, nonché la distribuzione e il posizionamento delle sostanze chimiche. Alcune sostanze presenti nelle cellule, come la clorofilla, possono emettere fluorescenza dopo essere state irradiate dai raggi ultravioletti; alcune sostanze di per sé non possono emettere fluorescenza, ma se sono colorate con coloranti fluorescenti o anticorpi fluorescenti, possono emettere fluorescenza dopo l'irradiazione con raggi ultravioletti. La microscopia a fluorescenza è uno degli strumenti per la ricerca qualitativa e quantitativa su tali sostanze.
I microscopi ottici sono generalmente costituiti da un tavolino, un sistema di illuminazione a faretto, una lente obiettivo, un oculare e un meccanismo di messa a fuoco. Modificando il metodo di illuminazione, il sistema di illuminazione a faretto può ottenere diverse modalità di osservazione come punti di oggetto scuro su sfondo chiaro (detta illuminazione in campo chiaro) o punti di oggetto chiaro su sfondo scuro (detta illuminazione in campo scuro), in modo da poter essere utilizzato in diverse situazioni. per scoprire e osservare meglio le strutture sottili.
Le differenze tra il microscopio a fluorescenza e il microscopio ordinario sono le seguenti:
1. Il metodo di illuminazione è solitamente l'epiilluminazione, ovvero la sorgente luminosa viene proiettata sul campione attraverso la lente dell'obiettivo;
2. La sorgente luminosa è luce ultravioletta, con lunghezza d'onda più corta e risoluzione più elevata rispetto ai normali microscopi;
3. Sono presenti due filtri speciali, quello davanti alla sorgente luminosa viene utilizzato per filtrare la luce visibile e quello tra l'oculare e la lente dell'obiettivo viene utilizzato per filtrare i raggi ultravioletti per proteggere gli occhi umani.
La microscopia a fluorescenza è anche un tipo di microscopio ottico. La differenza principale è la diversa lunghezza d'onda di eccitazione. Ciò determina le differenze nella struttura e nell'utilizzo tra i microscopi a fluorescenza e i normali microscopi ottici.
La microscopia a fluorescenza è uno strumento essenziale nella citochimica dell'immunofluorescenza. È composto da componenti principali come sorgente luminosa, sistema di piastre filtranti e sistema ottico. Utilizza la luce di una determinata lunghezza d'onda per eccitare il campione e farlo emettere fluorescenza, quindi ingrandisce l'immagine fluorescente del campione attraverso la lente dell'obiettivo e il sistema oculare.
