Microscopia biologica sul volume dei blocchi dei campioni di tessuto
Finora, la criofixation, il sezionamento ultra-tno congelato e la violazione del congelamento sono metodi di routine per la microscopia a raggi X di tessuti e cellule. Fornire i seguenti dettagli su questo metodo:
Un microscopio biologico con un riflettore può muovere i riflettori su e giù per ottenere una moderata luminosità e l'apertura dell'apertura variabile può anche essere modificata per ottenere una moderata luminosità. Se la luce è dal sole, i riflettori possono essere sollevati in modo appropriato e l'apertura della luce variabile può essere ingrandita in modo appropriato. Se la luce è troppo forte, i riflettori possono essere abbassati in modo appropriato e l'apertura dell'intersezione può essere ridotta in modo appropriato. Se ti senti ancora abbagliante in questa situazione, puoi scegliere di posizionare un filtro appropriato sulla staffa sotto i riflettori. Questa quercia può ottenere una luminosità che ti soddisfa. Naturalmente, la regolazione delle posizioni superiori e inferiori dei riflettori può cambiare la dimensione dell'apertura della lettura della luce e selezionare filtri adatti, che richiedono un certo periodo di pratica ed esperienza.
Un problema molto importante nella microscopia biologica è il processo di campionamento e isolamento delle cellule. Dopo essiccare il congelamento e l'incorporamento della resina (FD), le sezioni ultra-sottili congelate devono essere attentamente elaborate per garantire che il contenuto di 65 elementi di ciascuna parte non sia danneggiato durante l'osservazione e l'analisi. A causa dei numerosi passaggi e degli elevati costi coinvolti nella microanalisi a raggi X, è deplorevole trarre conclusioni errate se le cellule analizzate sono danneggiate o morte dopo elaborazione prolungata e multi-fase. Le cellule miocardiche separate dal trattamento con gelatinasi hanno due forme, una è a forma di asta lunga e l'altra è circolare. Quest'ultimo si riferisce alle cellule morenti danneggiate durante il processo di separazione cellulare.
Il contenuto e la distribuzione di elettroliti in questi due tipi di cellule sono molto diversi al microscopio biologico. La NA è molto alta e K è estremamente bassa nei cardiomiociti circolari e la concentrazione di CA nei dendriti lineari è molto alta. Dopo la verifica con altri metodi analitici, è stato dimostrato che l'alto NA e K basso K nelle cellule circolari e l'alta CA nei mitocondri sono il risultato del danno alla membrana durante la separazione cellulare. Il metodo di fissazione a freddo per cellule e tessuti spesso comporta prima tempestiva e quindi conservarli in azoto liquido. La fissazione di estinzione è cruciale per l'effetto di conservazione. Le cellule viventi o i tessuti freschi sono ricchi di acqua e, se spento, le parti delle cellule o dei tessuti che entrano in contatto diretto con il refrigerante (specialmente quando si utilizzano azoto liquido per il raffreddamento) sono spesso congelate e fissate prima, formando un "guscio" che ostacola la parte centrale delle cellule da schiacciare e fissi. Pertanto, quando si conducono microanalisi a raggi X, si scopre spesso che i cristalli di ghiaccio esistono nella parte centrale delle cellule più grandi. Per evitare che si verifichi questa situazione, una sostanza con un punto di fusione superiore rispetto all'azoto liquido ma inferiore di 806c viene utilizzata come refrigerante. Ci sono molte di queste sostanze, ma sono facili da ottenere e il più conveniente è il propano concentrato (punto di ebollizione 42.120c, punto di fusione 187.10c, peso molecolare 44,1), che ha anche una velocità di raffreddamento rapida. Ma il suo svantaggio è che è infiammabile.
